[发明专利]一种用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器、检测体系及应用有效
申请号: | 202110483363.5 | 申请日: | 2021-04-30 |
公开(公告)号: | CN113219163B | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
发明(设计)人: | 王国庆;丁善森;王璐阳;何芷毓;李钰金;田永帅;韩肖;王瑞华 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N21/33 |
代理公司: | 济南鲁科专利代理有限公司 37214 | 代理人: | 滕慧 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 食品 霉菌 毒素 检测 比色 传感器 体系 应用 | ||
1.一种用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,包括适配体序列,其特征在于,还包括修饰HS-DNA的纳米材料;HS-DNA序列为与适配体序列互补、中间具有错配碱基的序列;
所述霉菌毒素为赭曲毒素A;所述HS-DNA序列为:HS-(CH2)6-TGT CCG ATG CTC TTT CCACAC CCG ATC;
所述适配体序列为;GAT CGG GTG TGG GTG GCG TAA AGG GAG CATC GGA CA。
2.根据权利要求1所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述纳米材料为纳米金颗粒、纳米金棒或纳米金片。
3.根据权利要求2所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述纳米材料为纳米金颗粒,所述纳米金颗粒直径为15-50nm。
4.根据权利要求3所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述纳米金颗粒直径为20nm。
5.根据权利要求1所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述HS-DNA序列Tm值小于35℃。
6.根据权利要求1-5任一所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,包括修饰HS-DNA的纳米材料溶液、核酸适配体溶液、PB溶液、氯化镁溶液和氯化钠溶液;所述修饰HS-DNA的纳米材料溶液为HS-DNA-AuNPs溶液。
7.根据权利要求6所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述HS-DNA-AuNPs溶液的制备过程如下:
(1)准备直径为15-50nm的AuNPs,制备成溶液,备用;
(2)配制还原HS-DNA溶液,备用;
(3)将还原HS-DNA溶液与AuNPs溶液按一定物质量比例混合,室温孵育6h以上;逐步加入氯化钠溶液,使溶液终浓度为50 mM;室温静置使其老化;重复使用氯化钠溶液处理混合物,逐步滴加,依次增加反应液盐浓度,最终至300mM,过夜孵育;离心处理,去除未连接的DNA和溶液中的NaCl,重新分散于水中,即得。
8.根据权利要求7所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,步骤(2)还原HS-DNA溶液制备过程如下:
a将TCEP与HS-DNA按一定摩尔比混合,室温孵育,得混合溶液;
b在冰盒上进行如下操作:将CH3COONa加入含有TCEP的DNA上述混合溶液中,再加入冰乙醇,孵育一定时间,在10℃下离心,除去上清液,再加入冰乙醇,涡旋,继续离心,除去大部分上清,剩余液体于室温放置使乙醇挥发干净;加水复溶混匀,即得。
9.采用权利要求6-8任一所述的比色传感器的检测体系,其特征在于,所制备的修饰HS-DNA纳米材料溶液、核酸适配体溶液、PB溶液、氯化镁溶液、氯化钠溶液的终浓度分别为5nM、0.35μM、10mM、1mM、650mM。
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