[发明专利]一种用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器、检测体系及应用有效

专利信息
申请号: 202110483363.5 申请日: 2021-04-30
公开(公告)号: CN113219163B 公开(公告)日: 2022-04-26
发明(设计)人: 王国庆;丁善森;王璐阳;何芷毓;李钰金;田永帅;韩肖;王瑞华 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53;G01N21/33
代理公司: 济南鲁科专利代理有限公司 37214 代理人: 滕慧
地址: 266100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 食品 霉菌 毒素 检测 比色 传感器 体系 应用
【权利要求书】:

1.一种用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,包括适配体序列,其特征在于,还包括修饰HS-DNA的纳米材料;HS-DNA序列为与适配体序列互补、中间具有错配碱基的序列;

所述霉菌毒素为赭曲毒素A;所述HS-DNA序列为:HS-(CH2)6-TGT CCG ATG CTC TTT CCACAC CCG ATC;

所述适配体序列为;GAT CGG GTG TGG GTG GCG TAA AGG GAG CATC GGA CA。

2.根据权利要求1所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述纳米材料为纳米金颗粒、纳米金棒或纳米金片。

3.根据权利要求2所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述纳米材料为纳米金颗粒,所述纳米金颗粒直径为15-50nm。

4.根据权利要求3所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述纳米金颗粒直径为20nm。

5.根据权利要求1所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述HS-DNA序列Tm值小于35℃。

6.根据权利要求1-5任一所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,包括修饰HS-DNA的纳米材料溶液、核酸适配体溶液、PB溶液、氯化镁溶液和氯化钠溶液;所述修饰HS-DNA的纳米材料溶液为HS-DNA-AuNPs溶液。

7.根据权利要求6所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,所述HS-DNA-AuNPs溶液的制备过程如下:

(1)准备直径为15-50nm的AuNPs,制备成溶液,备用;

(2)配制还原HS-DNA溶液,备用;

(3)将还原HS-DNA溶液与AuNPs溶液按一定物质量比例混合,室温孵育6h以上;逐步加入氯化钠溶液,使溶液终浓度为50 mM;室温静置使其老化;重复使用氯化钠溶液处理混合物,逐步滴加,依次增加反应液盐浓度,最终至300mM,过夜孵育;离心处理,去除未连接的DNA和溶液中的NaCl,重新分散于水中,即得。

8.根据权利要求7所述的用于食品中霉菌毒素检测的比色传感器,其特征在于,步骤(2)还原HS-DNA溶液制备过程如下:

a将TCEP与HS-DNA按一定摩尔比混合,室温孵育,得混合溶液;

b在冰盒上进行如下操作:将CH3COONa加入含有TCEP的DNA上述混合溶液中,再加入冰乙醇,孵育一定时间,在10℃下离心,除去上清液,再加入冰乙醇,涡旋,继续离心,除去大部分上清,剩余液体于室温放置使乙醇挥发干净;加水复溶混匀,即得。

9.采用权利要求6-8任一所述的比色传感器的检测体系,其特征在于,所制备的修饰HS-DNA纳米材料溶液、核酸适配体溶液、PB溶液、氯化镁溶液、氯化钠溶液的终浓度分别为5nM、0.35μM、10mM、1mM、650mM。

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