[发明专利]核酸提取方法

说明书

一种核酸提取方法，包括：S101、将样本与裂解液混合，使样本充分裂解；S103、在S101得到的溶液中加入磁珠，使得磁珠与样本裂解出来的核酸结合；S105、磁棒移动至磁棒套内后，整体向下移动，进入溶液中吸附磁珠；吸附完成后，磁棒和磁棒套保持相对位置不动，上下振荡若干次；S107、将磁珠转移至清洗液中，磁棒套上下振荡使得磁珠均匀分散于清洗液，洗去附着在磁珠表面的、除核酸以外的物质；S109、利用磁棒将清洗完成的磁珠吸附于磁棒套外表面，并对磁珠和磁棒套进行干燥处理；S111、将干燥后的磁珠转移至洗脱液中进行洗脱，附着在磁珠上的核酸脱离磁珠进入洗脱液中，利用磁棒和磁棒套将溶液中的磁珠吸附回收，即得核酸溶液。本发明能够减小核酸提取量的损失。

技术领域

本发明涉及核酸提取领域，更具体的说，它涉及一种核酸提取方法。

背景技术

目前，核酸(例如DNA或者RNA)的提取主要采用离心柱法和磁珠法两种提取方法。磁珠法核酸提取是以纳米生物磁珠为载体的一种新型核酸提取技术，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用二氧化硅包被的纳米磁性微球的超顺磁性，在Chaotropic盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA。目前，对于DNA的提取，磁珠法核酸提取一般可以分为四步：裂解、结合、洗涤、洗脱。

磁珠法核酸提取仪器可分为：移液式和磁棒式。磁棒式核酸提取仪器采用磁棒法的磁性分离方式，通过特制的磁棒套进行转移磁珠同时转移样本，磁珠定向团聚在磁棒表面的专门的磁棒套上，通过精确的运动来实现磁珠从样本裂解液到洗涤液再到洗脱液，从而完成核酸测自动化提取过程。具体操过程如下：

加样本：加入液体样本到裂解液孔中；

裂解/结合：裂解液裂解样本(反应一段时间，期间底部加热加速裂解)，期间磁棒套(只有磁棒套、无磁棒)插入到液面下进行上下振荡混匀，使核酸悬浮在裂解液中；裂解完成后，加入磁珠，磁棒套上下振荡使得磁珠均匀分散到裂解液中吸附核酸，磁棒插入磁棒套内静置至磁珠都吸附在磁棒套上；

洗涤：将磁珠转移到洗涤液中，磁棒套上下振荡混匀使得磁珠均匀分散到洗涤液中，静置一段时间后，磁棒插入磁棒套静置至磁珠都吸附在磁棒套上；

洗脱：将洗涤后的磁珠取出，磁棒取出，磁棒套上下振荡混匀使得磁珠均匀分散到洗脱液中，一般加热至65℃/5min静置、加热使核酸与磁珠脱离，在较高的温度下、磁棒插入磁棒套静置至磁珠都吸附在磁棒套上，回收磁珠，如此，核酸提取仪的工作完成。

上述方法存在的问题是：在磁珠与核酸结合后，磁棒吸附磁珠过程中，由于相邻磁棒之间的磁场差异，以及磁棒和磁棒套在深孔板(容器)内的位置问题，会有部分磁珠被相邻孔内的磁棒引导，附着在深孔板(容器)内壁，导致核酸提取量损失较大。

发明内容

本发明的目的是针对上述存在的问题，提供一种能够减小核酸提取量损失的核酸提取方法。

为了达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现：

一种核酸提取方法，包括：

S101、将样本与裂解液混合，使样本充分裂解；

S103、在步骤S101得到的溶液中加入磁珠，使得磁珠与样本裂解出来的核酸结合；

S105、磁棒移动至磁棒套内后，整体向下移动，进入溶液中吸附磁珠；吸附完成后，磁棒和磁棒套保持相对位置不动，上下振荡若干次；

S107、将磁珠转移至清洗液中，磁棒套上下振荡使得磁珠均匀分散于清洗液，洗去附着在磁珠表面的、除核酸以外的物质；

S109、利用磁棒将清洗完成的磁珠吸附于磁棒套外表面，并对磁珠和磁棒套进行干燥处理；