[发明专利]组织透明化试剂盒和方法有效
申请号: | 202110479422.1 | 申请日: | 2021-04-29 |
公开(公告)号: | CN113218741B | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 吴科锋;李茜;叶华;罗辉;朱宇珍;戚怡 | 申请(专利权)人: | 南方海洋科学与工程广东省实验室(湛江) |
主分类号: | G01N1/36 | 分类号: | G01N1/36;G01N21/64 |
代理公司: | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人: | 刘瑞花 |
地址: | 524006 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 组织 透明 试剂盒 方法 | ||
本发明公开一种组织透明化试剂盒和方法,其中,组织透明化试剂盒包括芳香胺以及葡萄糖,芳香胺和葡萄糖用以配制分别将组织透明化处理的试剂一和试剂二;在试剂一中,芳香胺的质量比为25~40%,葡萄糖的质量比为5~10%;在试剂二中,芳香胺的质量比为30~45%,葡萄糖的质量比为30~45%。本发明组织透明化试剂盒可实现对组织(尤其是管状、腔体状组织)进行透明化处理,并对透明化的组织进行塑型,使得组织可用于制备冰冻切片或组织标本切片等。
技术领域
本发明涉及生物技术领域,特别涉及组织透明化试剂盒和方法。
背景技术
随着生命科学技术的快速发展,利用生物组织透明化技术获取生物组织的三维图像信息成为了研究的热点。目前,FOCM、SCALE、CUBIC、SEEDB、MACS等透明化技术已在生命科学领域得到了较为广泛的应用。但是,现有的透明化试剂处理后的组织(尤其是管状、腔体状的组织)比较松、软,难以塑型,使得组织无法再进行修饰或者切片等。
上述内容仅用于辅助理解发明的技术方案,并不代表承认上述内容是现有技术。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种组织透明化试剂盒和方法,旨在解决现有技术无法实现对生物组织塑型的技术问题。
为实现上述目的,第一方面,本发明提出一种组织透明化试剂盒,包括芳香胺以及葡萄糖,所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二,所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理;
其中,在所述试剂一中,所述芳香胺的质量比为大于或等于25%,且小于或等于40%;所述葡萄糖的质量比为大于或等于5%,且小于或等于10%;
在所述试剂二中,所述芳香胺的质量比为大于或等于30%,且小于或等于45%;所述葡萄糖的质量比为大于或等于30%,且小于或等于45%。
可选地,所述组织透明化试剂盒还包括尿素,所述尿素用以与所述芳香胺、所述葡萄糖共同配制成所述试剂一,所述尿素在所述试剂一中的质量比为大于0,且小于或等于5%。
可选地,所述组织透明化试剂盒还包括甘油,所述甘油用以与所述芳香胺、所述葡萄糖共同配制成所述试剂一,所述甘油在所述试剂一中的质量比为大于0,且小于或等于2%。
可选地,所述组织透明化试剂盒还包括尿素,所述尿素用以配合所述芳香胺、所述葡萄糖配制所述试剂二,所述尿素在所述试剂二中的质量比为大于0,且小于或等于1%。
可选地,所述芳香胺包括邻苯二甲胺、间苯二甲胺或对苯二甲胺及其衍生物的至少一种。
第二方面,本发明还提出一种组织透明化方法,包括以下步骤:
(1)将固定过的组织放入试剂一中孵育,得到初步透明化的组织;
(2)将上步所得的初步透明化的组织放入试剂二中孵育,得到水凝胶包埋的透明化组织。
可选地,所述组织放入所述试剂一中的孵育温度为大于或等于25℃,且小于或等于37℃;所述组织放入所述试剂一中的孵育时间为大于或等于4小时,且小于或等于48小时。
可选地,所述组织放入所述试剂二中的孵育温度为大于或等于4℃,且小于或等于37℃;所述组织放入所述试剂二中的孵育时间为大于或等于6小时,且小于或等于48小时。
本发明组织透明化试剂盒包括芳香胺以及葡萄糖,所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二,所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理;其中,在所述试剂一中,所述芳香胺的质量比为大于或等于25%,且小于或等于40%;所述葡萄糖的质量比为大于或等于5%,且小于或等于10%;在所述试剂二中,所述芳香胺的质量比为大于或等于30%,且小于或等于45%;所述葡萄糖的质量比为大于或等于30%,且小于或等于45%。
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