[发明专利]一种利用混合菌生产漆酶的方法

权利要求书

1.一种利用混合菌生产漆酶的方法，其特征是，利用真菌一色齿毛菌(Cerrenaunicolor Han 849)、桦褶孔菌(Lenzites betulinus Han 851)、裂褶菌(Schizophyllumcommune Han 881)混合发酵含有木质纤维素材料的基础培养液，生产漆酶。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是，所述木质纤维素材料为梧桐木粉、油松木粉，优选为梧桐木粉。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，每100ml基础培养液中含有木质纤维素材料的质量为1-4g，优选为2-3g。

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述基础培养液的组成为：磷酸二氢钾1.0-2.0g，定容至1L，pH自然。

5.如权利要求1或2所述的方法，其特征是，所述混合发酵的条件为：暗培养；培养温度为25-28℃。

6.一种利用混合菌生产漆酶的方法，其特征是，包括如下顺序进行的步骤：

1)将真菌一色齿毛菌(Cerrena unicolor Han 849)、桦褶孔菌(Lenzites betulinusHan 851)、裂褶菌(Schizophyllum commune Han 881)分别接种到固体CYM平板完全培养基上，进行菌种活化处理；

2)将3支活化培养后的菌株分别接种于液体完全培养基中，分别进行扩大培养，制得一色齿毛菌扩大培养混合物、桦褶孔菌扩大培养混合物、裂褶菌扩大培养混合物；

3)在无菌操作条件下采用匀浆机分别对一色齿毛菌扩大培养混合物、桦褶孔菌扩大培养混合物、裂褶菌扩大培养混合物进行均质处理，制得一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体；

4)将一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体混合接种于含有木质纤维素材料的基础培养液中，进行发酵培养；或

将一色齿毛菌均质体、裂褶菌均质体混合接种于含有木质纤维素材料的基础培养液中，进行发酵培养；或

将桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体混合接种于含有木质纤维素材料的基础培养液中，进行发酵培养；或

将一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体混合接种于含有木质纤维素材料的基础培养液中，进行发酵培养。

7.如权利要求6所述的方法，其特征是，步骤4)中所述一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体的体积之比为1：(1-2)，优选为1:1；所述一色齿毛菌均质体、裂褶菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中一色齿毛菌均质体、裂褶菌均质体的体积之比为1：(1-2)，优选为1:1；所述桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体的体积之比为1：(1-2)，优选为1:1。

8.如权利要求6或7所述的方法，其特征是，步骤4)中所述一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中一色齿毛菌均质体、桦褶孔菌均质体、裂褶菌均质体的体积之比为1:1:1。

9.如权利要求6或7所述的方法，其特征是，步骤4)中一色齿毛菌、桦褶孔菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中一色齿毛菌和桦褶孔菌均质体的体积之和与含有木质纤维素材料的基础培养液的体积之比为(2-6)：100，优选为3:100；一色齿毛菌、裂褶菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中一色齿毛菌和裂褶菌均质体的体积之和与含有木质纤维素材料的基础培养液的体积之比为(2-6)：100，优选为3:100；裂褶菌、桦褶孔菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中裂褶菌和桦褶孔菌均质体的体积之和与含有木质纤维素材料的基础培养液的体积之比为(2-6)：100，优选为3:100；所述一色齿毛菌、桦褶孔菌、裂褶菌均质体混合接种，进行发酵培养过程中一色齿毛菌、桦褶孔菌、裂褶菌均质体的体积之和与含有木质纤维素材料的基础培养液的体积之比为(2-6)：100，优选为3:100。

10.如权利要求6或7所述的方法，其特征是，步骤4)中所述木质纤维素材料为梧桐木粉、油松木粉，优选为梧桐木粉。