[发明专利]载脂蛋白E受体模拟肽6KApoEp在制备治疗脑出血后继发性脑损伤药物中的应用

说明书

本发明公开了载脂蛋白E受体模拟肽6KApoEp在制备治疗脑出血后继发性脑损伤药物中的应用，并公开了载脂蛋白E受体模拟肽6KapoEp的蛋白序列、载脂蛋白E受体模拟肽6KapoEp的蛋白序列的构建方法，以及应用混合液的制备，应用6KApoEp后，可减少CypA的表达，通过抑制/MMP‑9通路的激活，减轻脑出血后脑水肿和血脑屏障损害以及促炎因子的产生；使脑含水量下降、BBB通透性改善，促进血脑屏障相关蛋白如claudin‑5、occludin、ZO‑1的增加，通过抑制CypA/NF‑KB/MMP‑9来调控脑出血后炎症反应，降低脑组织含水量，改善血脑屏障通透性，从而减轻脑出血后继发性脑损伤，对脑出血起到神经保护作用，降低脑出血后炎性反应、改善血脑屏障通透性作用。

技术领域

本发明涉及一种载脂蛋白E受体模拟肽6KApoEp在制备治疗脑出血后继发性脑损伤药物中的应用，属于脑出血治疗技术领域。

背景技术

脑出血(Intracerebral hemorrhage ICH)是脑卒中的第二种常见亚型，约占所有卒中的10％～20％，发病率为10～30人/10万/年，30天死亡率达40％，幸存的ICH患者有严重的神经功能缺陷，其中只有20％的患者在发病6个月后生活自理，且仍具有很高的再次出血和继发性卒中的风险，严重威胁病人的生命和健康。

脑出血后的病理生理机制除了血液快速积累导致正常脑组织解剖结构的破坏和血肿对周围组织直接压迫产生的机械性损害外还包括继发性脑损害，脑出血后血液中的多个成分如：红细胞、白细胞、血小板等被释放到脑实质中，并通过不同途径激活小胶质细胞、星型胶质细胞和巨噬细胞，产生一系列炎性反应导致神经元坏死及血脑屏障(Blood-brainbarrier，BBB)损害如图1所示。

当脑出血产生炎性反应后，细胞内依赖核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B,)产生的亲环素A(CyclophlinA,CypA)被分泌到细胞外环境中，并诱导单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和T细胞的趋化；在急性神经损伤中，CypA介导核易位和/或DNA的活性，促进AIF介导神经细胞死亡，加重脑损伤。

过度分泌到细胞外的CypA可刺激炎性细胞因子如肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α，TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9，MMP-9)的产生，加重脑出血后炎性反应；通常NF-κB以p50和p65亚基的异源二聚体形式存在于细胞质中，脑出血后，NF-κB被激活导致p50和p65亚基向细胞核解离和易位，从而促进肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6(interleukin-6，IL-6)、诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase ，iNOS)、细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)等转录，这些物质与脑出血后血脑屏障破坏、脑水肿和神经细胞坏死密切相关。

作为NF-κB靶基因的MMP-9在炎性反应促发下，由白细胞、血管内皮细胞及胶质细胞等分泌到细胞外间隙，由凝血纤溶酶、血红蛋白降解产物等激活，NF-κB会消化血管周围基底膜成分(IV型胶原、层黏连蛋白、纤维连接蛋白)和紧密连接蛋白(Tight junction，TJ)，内皮细胞间的紧密连接蛋白是BBB的形态基础，它形成一个连续的细胞间网络，在内皮细胞、上皮细胞和胶质组织中选择性调节水、离子和溶质。

组成TJ结构所需要的跨膜蛋白中的闭合蛋白(claudin-5)是最重要的，它可影响TJ对离子的通透性；另一类跨膜蛋白为咬合蛋白(occludin)，它与激动蛋白丝的膜内链有关，并调节TJ结构亲水分子的扩散；此外闭合小环蛋白-1(Zonula occluden-1，ZO-1)可与闭合蛋白(claudin-5)、咬合蛋白(occludin)和肌动蛋白相互作用，对TJ结构的组装和稳定性具有重要。