[发明专利]改良的干细胞组合物

说明书

本公开提供了表达高水平的血管生成素‑1(Ang1)的干细胞和其产生方法。此类干细胞可以用于一系列治疗应用。

本申请是CN201580018440.2的分案申请。

技术领域

本公开涉及表达高水平血管生成素-1(Ang1)的干细胞和其产生方法。此类干细胞可以用于一系列治疗应用，以例如促进血管形成和/或血管生成。

发明背景

血管生成素属于血管生长因子家族，血管生长因子在胚胎和出生后血管生成中起作用。Ang1促进内皮细胞和一些非内皮细胞(例如平滑肌细胞)的迁移。Ang1还诱导内皮细胞萌发和重新组织到小管中。Ang1对内皮细胞发挥有效的消炎作用，遏制血管内皮生长因子(VEGF)诱发的E-选择素、ICAM-1和VCAM-1上调，并抑制回应于VEGF和TNF-α的白细胞附着和迁移(Kim等人2001a)。

许多研究已经表明，Ang1的过度表达或补充Ang1的添加在减轻局部缺血和恢复包括四肢、脑部、关节、肾和最显著地心脏在内的若干器官的功能方面具有有益的作用。其它有益的作用包括减轻血栓(Kim等人2001b)。因此，Ang1展现出大量将暗示其用作心血管疾病治疗剂的效用的重要特性。

在功能性血管系统的发育所需的生长因子级联中，Ang1和VEGF发挥重要作用。因此，对于缺血性心肌治疗中的治疗性血管形成，Ang1与VEGF组合使用也被视为一种非常有希望的候选疗法。

以前，Ang1与VEGF-A组合施用到测试动物中的心肌梗塞或周围梗塞区域中显示增加新血管形成并减少心肌细胞凋亡，引起注射部位的心肌细胞再生增加，而且改善血管灌注和心脏功能。次最大剂量的约20:1比率的Ang1和VEGF加强这些作用，并比单独任一因子更有效(Chae等人2000)。这些结果表明Ang1与VEGF组合治疗可以用于产生治疗性血管形成。

近来，干细胞疗法已经显现为缺血性心脏病的潜在治疗之一(Huang等人2011；Lijie等人2007)。

由于在许多类型的干细胞中血管生成因子的表达不足，所以单独干细胞用于促进血管生成仍然受限。涉及用编码Ang1的核酸分子转染干细胞的干细胞遗传修饰已经用以解决此限制。然而，由于技术复杂且遗传修饰过程引起可能不合需要的作用，所以使用经遗传修饰的干细胞具有其缺点。

发明概要

本公开是基于表达高水平Ang1的干细胞群体的意外产生，不需要用表达Ang1的核酸转染细胞。在一个实例中，此干细胞群体还表达低水平VEGF，且所产生的Ang1:VEGF的比率与Chae等人(2000)所示的特别有效地加强血管形成的比率一致。

因此，本公开提供了一种组合物，其包含未遗传修饰的干细胞，其中所述未遗传修饰的干细胞表达至少0.1μg/10⁶个细胞的量的Ang1。

在另一实例中，组合物包含表达至少0.5μg/10⁶个细胞的量的Ang1的干细胞。在另一实例中，干细胞表达至少0.7μg/10⁶个细胞的量的Ang1。在另一实例中，干细胞表达至少1μg/10⁶个细胞的量的Ang1。

在另一实例中，干细胞表达少于约0.05μg/10⁶个细胞的量的VEGF。在另一实例中，干细胞表达少于约0.03μg/10⁶个细胞的量的VEGF。在另一实例中，干细胞表达少于约0.02μg/10⁶个细胞的量的VEGF。