[发明专利]一种起始免疫细胞活化扩增体系及其应用有效
申请号: | 202110467793.8 | 申请日: | 2021-04-28 |
公开(公告)号: | CN113088489B | 公开(公告)日: | 2022-01-07 |
发明(设计)人: | 翟志敏;高志买;李丛;王会平 | 申请(专利权)人: | 安徽医科大学第二附属医院;鲁超 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;A01N1/02 |
代理公司: | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人: | 揭冲 |
地址: | 230601 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 起始 免疫 细胞 活化 扩增 体系 及其 应用 | ||
1.一种起始免疫细胞活化扩增体系,其特征在于,包括:活化培养基和扩增培养基;所述活化培养基包括基础培养基、CD3抗体、CD28抗体、IL-2、IL-7、IL-15和TGF-β拮抗剂;其中CD3抗体和所述CD28抗体在所述活化培养基的浓度均为50~200 ng/mL;其中所述IL-2在所述活化培养基的浓度为50~300 IU/mL;所述IL-7在所述活化培养基的浓度为10~20 ng/mL;所述IL-15在所述活化培养基的浓度为10~20 ng/mL;所述TGF-β拮抗剂在所述活化培养基的浓度为10~500 ng/mL;所述基础培养基为免疫细胞专用培养基;所述TGF-β拮抗剂选自TGF-βR 抗体;所述扩增培养基包括基础培养基、IL-2、IL-7和IL-15;其中所述IL-2在所述扩增培养基的浓度为50~300 IU/mL;所述IL-7在所述扩增培养基的浓度为10~20 ng/mL;所述IL-15在所述扩增培养基的浓度为10~20 ng/mL;其中,所述起始免疫细胞为外周血单个核细胞。
2.一种活化扩增起始免疫细胞的方法,其特征在于,采用权利要求1所述起始免疫细胞活化扩增体系,包括以下步骤:将起始免疫细胞采用所述活化培养基进行活化,再采用所述扩增培养基进行扩增。
3.根据权利要求2所述的一种活化扩增起始免疫细胞的方法,其特征在于,所述起始免疫细胞在所述扩增培养基中的细胞浓度为(0.5~1)×106个/mL。
4.根据权利要求3所述的一种活化扩增起始免疫细胞的方法,其特征在于,所述扩增之后,还包括:冻存。
5.根据权利要求4所述的一种活化扩增起始免疫细胞的方法,其特征在于,所述冻存的冻存液中的人血白蛋白浓度为0.5 wt%~1 wt%;所述冻存的冻存液中的DMSO浓度为5 wt%。
6.一种制备靶向免疫细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:采用权利要求1所述起始免疫细胞活化扩增体系对起始免疫细胞依次进行活化和初步扩增后,嵌合抗原受体,进一步扩增,得到靶向免疫细胞。
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