[发明专利]一种土壤功能性微生物筛选方法

说明书

本发明公开了一种土壤功能性微生物筛选方法。所述方法在循环流化式土壤功能微生物快速筛选与驯化装置中进行，包括如下步骤：在流化床体内填充供试土壤；先开启所述气泵，后通过蠕动泵加入液体培养基；在气泵通入的气体的作用下，供试土壤中的固体颗粒被带出，气体与固体颗粒分离后，在蠕动泵的作用下以流态化状态循环流动；定期取样，并分别涂布于固体培养基上进行培养，经分离、提纯得到单菌落，即实现对土壤中功能性微生物的筛选。本发明筛选过程中土壤保持原有结构，功能受影响较小；环流液体含有氧气使得土壤中有氧气分布；采取土壤样品时可以只采取环流液，使得采样容易，同时土壤本身也可供采样；环流液体可随时替换，满足不同实验需求。

技术领域

本发明涉及一种土壤功能性微生物筛选方法，属于微生物筛选技术领域。

背景技术

筛选对污染物具有高效降解能力并能够抵抗土著微生物竞争的微生物制剂是生物强化修复技术的基础。富集培养技术(enrichment culture)是通过选择某些因子(如碳源、氮源、通气条件、电子受体、温度、pH或光照等)形成特殊的环境条件，并以含有各种微生物的样品(如土壤或污泥)作为筛选源，使最适应该生长条件的微生物生长速率超过其他微生物。在同样条件下反复培养，可分离出富集的菌株，例如通过液相富集培养方法便可得到多株高效降解污染物的微生物。传统的方法为液相富集培养，因其条件与土壤环境差别较大，培养过程破坏了原土壤环境中微生物群落相互作用，所得到的微生物菌群多样性大大降低，导致其应用于生物强化修复时不能发挥预期的作用。因此，需要提供一种高效快速的土壤功能微生物的筛选方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种土壤功能性微生物筛选方法，即土壤环流法(soilperfusion)，该方法不打乱土壤体系，不破坏土壤的结构，在尽可能接近于自然状态下筛选分离土壤中微生物，有利于筛选能够适应土壤生态环境的微生物制剂。

本发明所提供的土壤功能性微生物筛选方法在循环流化式土壤功能微生物快速筛选与驯化装置中进行，所述循环流化式土壤功能微生物快速筛选与驯化装置的结构如下：

包括流化床体、气泵和蠕动泵；

所述流化床体的上部和下部分别配合有出液器和进液器，所述出液器和所述进液器与所述流化床体之间设有多孔筛板；

所述出液器上设有出液口和排气口/取样口；

所述进液器上设有两个接口，分别与所述气泵和所述蠕动泵连接，所述蠕动泵的入口与所述出液口连接。

优选地，所述流化床体为圆柱体，具有内部空间利用率高、节约放置空间的优点；

优选地，所述流化床体的材质可为透明的有机玻璃，以方便观察流化态情况，保证光照；如需避光培养，可用覆盖物遮住进行。

优选地，所述出液器和所述进液器均为圆柱体。

优选地，所述多孔筛板上设有若干圆孔，所述圆孔的孔径可为3～5mm，优选为4mm。

优选地，所述出液器与所述多孔筛板之间、所述多孔筛板与所述流化床体之间以及所述多孔筛板与所述进液器之间均设有密封垫片，所述密封垫片起到密封作用，以加强所述多孔筛板与所述流化床体之间的契合。

优选地，设于所述流化床体与所述进液器之间的所述多孔筛板的上部设有纱布，用来阻挡细沙流入底部，堵塞小管口影响流通与蠕动。

采用所述循环流化式土壤功能微生物快速筛选与驯化装置进行土壤微生物筛选时，按照如下步骤进行：

S1、在所述流化床体内填充供试土壤；

所述供试土壤为受污染的土壤；