[发明专利]一种枯草芽孢杆菌、培养方法及应用

说明书

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001、培养方法及其应用，属于微生物技术领域。本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001，包括:保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2017年11月20日，保藏编号为CGMCC NO.14929。本发明提供的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001对柑橘炭疽病有良好防效；对柑橘促生、促产效果良好；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001培养条件简单，培养周期短，易于工业化生产及保存，具有良好的开发应用前景。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001的培养方法及应用。

背景技术

柑橘在我国南方种植面积较大，是南方主要种植的水果之一。其中，沙糖桔作为柑橘优势品种之一，其易剥皮、果汁多、无核、口感好，并且具有清肠、健脾、润肺、化痰等诸多功效而深受消费者的喜爱。不但销售于全国各省市，而且出口世界各地，市场广阔。

炭疽病是柑橘最常见的病害，它具有危害广和危害时间长的特点，主要危害叶片、枝条、花、果实和果柄，常造成蜜橘和橙类等柑橘品种大量落叶、枝条枯死、大量落花、落果和果实腐烂。在条件适宜的地区，可常年危害柑橘。

近几年有些田园沙糖桔叶片感染炭疽病，造成叶片黄化问题较为严重，沙糖桔品质、产量下降，对于这一问题，大部分是通过农事操作进行防治。对于沙糖桔病害的防控也是局限于使用农药和田间管理，使用农药后残留问题及成本都比较高，有部分使用有益微生物进行防控，也是局限于沙糖桔采摘后对果实的优化贮藏，很少有使用有益微生物对沙糖桔果树进行处理。

发明内容

为了解决上述农业生产存在的技术问题及现有技术的不足，本发明提供了一种对柑橘炭疽病有良好防效的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001。

为达此目的，本发明采用以下技术方案。

在第一方面，本发明提供一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2017年11月20日，保藏编号为CGMCC NO.14929。

在第二方面，提供一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001的培养方法，包括如下步骤：

(1)取活化后的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001，接种于种子培养基，在温度为28～33℃、转速为180～240r/min的条件下，培养10～12h，制得液体种子；

(2)取步骤(1)制得的液体种子，按体积百分比2％的比例接种于发酵培养基，在温度为28～33℃、转速为180～240r/min的条件下，培养28～40h，制得发酵菌液。

优选的，在步骤(1)前还包括将所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001进行活化的步骤：

取枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)JNKC001，斜面转接至培养基上进行活化；其中，活化温度为28～33℃、培养时间为12～16h。

优选的，活化培养基和步骤(1)中种子培养基组分如下：蛋白胨7g,NaCl5g,牛肉膏3g,琼脂20g,H₂O 1000mL,pH 7。

优选的，步骤(2)中发酵培养基中各组分的含量以质量百分比表示如下：葡萄糖0.3％～2％，玉米粉1％～5％，豆粕粉1％～5％，磷酸氢二钠0.1‰～0.5‰，磷酸二氢钠0.5‰～5‰,pH6.5～7.5。