[发明专利]一种哈茨木霉菌、培养方法、应用及复合生物制剂

说明书

本发明公开了一种哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株、培养方法及其应用，属于微生物技术领域。本发明的哈茨木霉(Trichodermaharzianum)JNHC菌株，包括:保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2017年11月20日，保藏编号为CGMCC NO.14638。本发明提供的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC对柑橘溃疡病有良好防效；对柑橘促生、促产效果良好；哈茨木霉(Trichodermaharzianum)JNHC菌剂与其他农药化肥配合力高，保护植物根系，提高肥料利用率。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株、培养方法、应用及复合生物制剂。

背景技术

柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodispv.citri)引起的一种国内外检疫性细菌病害，主要侵染芸香科柑橘属、枳属及金柑属植物，引起柑橘叶片、果实、枝干溃疡斑，导致树势生长衰弱，产量和品质下降，造成巨大的经济损失。

目前国内对柑橘溃疡病的防治主要以化学防治为主，众所周知，化学农药的长期大量使用往往会导致环境污染、农药残留及病原菌的抗药性等诸多问题难以解决。利用植物内生菌产生的抗菌活性物质进行植物病害的生物防治，则具有高效、低毒、低残留、无污染、不易产生抗药性和原料易得等优点。因此，柑橘产业现急需一种对柑橘溃疡病有良好防效的生物制剂。

发明内容

为了解决上述农业生产存在的技术问题及现有技术的不足，本发明提供了一种对柑橘溃疡病有良好防效的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株。

为达此目的，本发明采用以下技术方案。

在第一方面，本发明提供一种哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2017年11月20日，保藏编号为CGMCC NO.14638。

在第二方面，提供一种哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将活化的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株接种到PDA液体培养基上，转速为100-140r/min的条件下，培养温度为25-30℃，培养时间为50-72h，制得种子液；

(2)将步骤(1)制得的种子液接种至液体发酵培养基中，在25-30℃的条件下发酵培养，制得发酵液；

(3)将步骤(2)制得发酵液按质量百分比20％-30％的比例接种于固体发酵培养基中，在25-30℃、空气湿度60％-90％的条件下，固体发酵72-96h，40℃以下烘干至含水量低于10％，粉碎，包装。

优选的，在步骤(1)前还包括将所述哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株进行活化的步骤：

将哈茨木霉(Trichoderma harzianum)JNHC菌株接种于PDA培养基平板上，于25-30℃，条件下培养3-6天，制得活化菌株。

优选的，所述步骤(2)中的液体发酵培养基的各组分如下：

马铃薯12-15g，葡萄糖3-5g，磷酸氢二钾0.8-1.5g，氯化钠1.0-3.0g，水定容至1L，p H 4.5-5。

优选的，所述步骤(3)中固体发酵培养基按如下方法制备：

将麦麸30-50份、豆粕20-40份、稻壳10-30份、矿物质元素0.5-2份，加水直至混合物密度为3-7g/ml，调pH4.5-5，即得。