[发明专利]一种产膜海鞘素B的菌种及其应用

说明书

本发明公开了一种运动替斯崔纳菌(Tistrella mobilis)HDCC00053，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.22003。所述的运动替斯崔纳菌(Tistrella mobilis)HDCC00053(CGMCC NO.22003)为一株全新的膜海鞘素B产生菌，生产能力高，其产生膜海鞘素B的能力比现有技术中其他菌种有了大幅度的提高，膜海鞘素B的效价可达到在300mg/L以上，有利于实现工业化生产。

技术领域

本发明涉及工业微生物发酵技术领域，具体涉及一种产膜海鞘素B的菌种及其应用。

背景技术

膜海鞘素B(didemnin B)源于美国伊利诺州立大学Rinehart教授小组于1981年从加勒比海域生息的一种进化较低的原索动物Didemnum solidum体内发现。膜海鞘素B属于环状缩酚酸肽类化合物，于1984年进入I期临床实验阶段(由辉瑞开发，曾处于临床二期，用于治疗脑肿瘤，恶性肿瘤和非霍奇金淋巴瘤)，是第1个在美国进入临床研究的海洋天然产物。体内筛选结果显示，膜海鞘素B具有强烈的抗P388白血病和B16黑色素瘤活性，可诱导HL-60肿瘤细胞的迅速凋亡以及许多转化细胞的凋亡，进一步药理研究表明，该化合物对L1210白血病细胞的IC50为2ng/mL。目前该化合物及更多的衍生物正在进行一系列的研究中，有望发现疗效更好、毒副作用更低的抗肿瘤药物。

由于膜海鞘素B所具有的生物学和化学特性，在开展相关的抗肿瘤生物活性检测实验及得到更多的衍生物中，需要大量制备相应的膜海鞘素B样品，以满足各种临床前的活性研究，而现目前，已报道的关于膜海鞘素B的制备方法主要有化学合成法和微生物发酵法，其中文献Efficient Total Synthesis of Didemnins A and B和文献TotalSynthesis of Didemnins A,B,and C报道了化学合成方法，但合成方法仅停留在实验室阶段，且化学合成存在反应步骤长，收率低的问题。现有技术报道的微生物发酵产膜海鞘素B的效价水平普遍较低，JP2012240974A报道了运动型Citrella mobilis YIT12409(FERMAP-22080)的菌株，该菌株具有生产膜海鞘素B的能力，其效价通过计算得出约为20mg/L。文献Bacterial Production of the Tunicate-Derived Antitumor Cyclic DepsipeptideDidemnin B中报道的α-proteobacterium Tistrella mobilis产膜海鞘素B的效价约为3.2mg/L；文献Bacterial Biosynthesis and Maturation of the Didemnin Anti-cancerAgents也报道了通过微生物T.mobilis KA081020-065发酵得到0.2mg/L产量低。

综上所述，针对现有技术中发酵获得膜海鞘素B存在发酵产量低，而化学合成制备工艺中存在的合成步骤长、收率低，较不安全等一系列的问题，因此，本发明寻求一种新的微生物，并可通过简单的发酵即可获得较高发酵产量的膜海鞘素B，从而实现膜海鞘素B较低的生产成本。

发明内容

为了解决膜海鞘素B现有制备方法不足的问题，本发明的目的之一在于提供一种新的膜海鞘素B生产菌，该菌为运动替斯崔纳菌(Tistrella mobilis)HDCC00053，于2021年3月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC NO.22003，并登记在册，证明存活。

本发明所述的菌株的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明的目的还在于提供了一种运动替斯崔纳菌(Tistrella mobilis)HDCC00053(CGMCC NO.22003)在制备膜海鞘素B中的应用。