[发明专利]一种杜仲转基因植株再生体系的构建方法有效
| 申请号： | 202110454403.3 | 申请日： | 2021-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN113122569B | 公开（公告）日： | 2022-07-08 |
| 发明（设计）人： | 孟冬;杨清;杨琬珑;付玉杰;刘腾跃;杜婷婷;牛丽丽;董碧莹;曹红燕 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 李博 |
| 地址： | 100083 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 杜仲 转基因 植株 再生 体系 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种杜仲转基因植株再生体系的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：将含目标基因重组载体的发根农杆菌悬浮液注射到杜仲幼苗的茎部，待杜仲幼苗茎部伤口处的愈伤组织分化为再生毛状根，以再生毛状根为外植体进行组织培养，直至获得完整的杜仲转基因幼苗；
所述注射的位置位于幼苗原始毛状根系上方1-1.5cm处的茎部；
所述发根农杆菌悬浮液的OD600值为0.5-0.7；
所述组织培养的愈伤组织诱导培养基为：基础培养基+2-2.5mg/L 6-BA+1-1.5mg/LNAA+700-800mg/L脯氨酸+500-600mg/L LH+30g/L蔗糖+8g/L琼脂，pH＝5.8；
所述组织培养的愈伤组织分化培养基为：基础培养基+1.0-1.5mg/L 6-BA+1.0-1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂，pH＝5.8；
所述组织培养的生根培养基为：基础培养基+30-35g蔗糖，pH为5.8-6；
所述发根农杆菌的菌株为K599。
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述杜仲幼苗为生长10-20天的幼苗。
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述组织培养的温度为23-27℃，光照周期为16h，光照强度为1800Lx。
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