[发明专利]一种具有脂肪酶活性的蛋白PnlipA及其基因和应用

说明书

本公开涉及一种具有脂肪酶活性的蛋白PnlipA、编码该蛋白的基因、插入有该基因的重组载体、转化有该基因的转化体、扩展该基因的引物、制备脂肪酶的方法和脂肪酶在降解脂肪类化合物中的应用。本公开为新型脂肪酶的应用提供了极大的方便，更好地满足了脂肪酶在实际工业应用中的需求。

技术领域

本公开涉及基因工程技术领域，具体地，涉及一种具有脂肪酶活性的蛋白、编码该蛋白的基因、插入有该基因的重组载体、转化有该基因的转化体、扩展该基因的引物、制备脂肪酶的方法和脂肪酶在降解脂肪类化合物中的应用。

背景技术

脂肪酶是重要的工业酶制剂品种之一，可以催化解脂、酯交换、酯合成等反应，广泛应用于油脂加工、食品、医药、日化等工业。脂肪酶在自然界中普遍存在，是从植物、动物和微生物中分离出来的。其中，微生物脂肪酶主要来源于真菌和细菌，其产生时间短，易于遗传操作、规模扩大和纯化，有利于工业应用，与真菌脂肪酶相比，细菌脂肪酶通常使用更多，并且表现出更高的活性，在生物技术应用领域有着重要的作用。

但是，目前脂肪酶仍然不能完全满足实际应用的需求，仍然需要提高产量以进一步降低生产成本和/或进一步提高催化活性。因此，需要探索和发现更多的脂肪酶。

发明内容

为了进一步满足实际应用的需求，本公开提供了具有脂肪酶活性的蛋白PnlipA、编码该蛋白的基因、插入有该基因的重组载体、转化有该基因的转化体、扩展该基因的引物、制备脂肪酶的方法和脂肪酶在降解脂肪类化合物中的应用。

本公开第一方面提供了一种具有脂肪酶活性的蛋白，所述蛋白为如下蛋白(a)或(b)：

(a)由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加n个氨基酸且具有脂肪酶活性的由(a)衍生的蛋白，其中，n为1～28之间的任意一个整数。

本公开第二方面提供了一种编码如下蛋白(a)或(b)的基因：

(a)由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加n个氨基酸且具有脂肪酶活性的由(a)衍生的蛋白，其中，n为1～28之间的任意一个整数。

本公开第三方面提供了一种重组载体，所述重组载体插入有第二方面所述的基因。

本公开第四方面提供了一种转化体，所述转化体的宿主为基因工程菌；所述转化体中导入的基因包括第二方面所述的基因，或者，所述转化体中导入的重组载体包括第三方面所述的重组载体。

本公开第五方面提供了一种引物，所述引物包括正向引物和反向引物；所述正向引物是核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示的DNA分子；所述反向引物是核苷酸序列为SEQ IDNO.5所示的DNA分子。

本公开第六方面提供了一种制备脂肪酶的方法，所述方法包括：将第四方面所述的转化体接种于培养基中进行培养，得到培养后的物料。

本公开第七方面提供了一种脂肪酶在降解脂肪类化合物中的应用，其中，所述脂肪酶含有第一方面所述的蛋白。

通过上述技术方案，本公开提供了具有脂肪酶活性的蛋白、编码该蛋白的基因、插入有该基因的重组载体、转化有该基因的转化体、扩展该基因的引物、制备脂肪酶的方法和脂肪酶在降解脂肪类化合物中的应用，为低成本生产高产新型的脂肪酶奠定基础，在油脂加工、食品、医药、日化等工业产业中具有重要的应用潜力。

本公开的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本公开的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本公开，但并不构成对本公开的限制。在附图中：