[发明专利]硫酸特布他林中有关物质的检测方法

说明书

本发明提供了一种用于检测硫酸特布他林中有关物质的方法，它采用高效液相色谱进行检测。该方法可以较好地实现强极性杂质的保留及弱极性杂质的有效洗脱，同时还能够降低溶剂对色谱设施的损害。

技术领域

本发明涉及一种硫酸特布他林中有关物质的检测方法。

背景技术

硫酸特布他林，化学名称为(±)-α-[(叔丁氨基)甲基]-3,5-二羟基苯甲醇硫酸盐(2∶1)，结构式如下，是一种肾上腺素能激动剂，可选择性激动β2-受体，舒张支气管平滑肌、抑制内源性致痉挛物质的释放及内源性介质引起的水肿，提高支气管粘膜纤毛上皮廓清能力，也可舒张子宫平滑肌。主要用于支气管哮喘、慢性支气管炎和其它伴有支气管痉挛的肺部疾病，也可用于预防早产和胎儿窒息，具有选择性高、副作用少等特点，在国内外已得到广泛应用。该品种目前在中国、美国、日本、欧洲、英国药典等均已收载。目前本品制剂主要有硫酸特布他林片、硫酸特布他林吸入气雾剂、硫酸特布他林雾化液。

硫酸特布他林结构式

硫酸特布他林收载于USP、EP、BP、JP及ChP，其中关于有关物质的控制方法基本一致：系统采用主成分与杂质C的混合溶液考察分离度，流动相体系采用含高浓度己烷磺酸钠的甲酸铵缓冲溶液与甲醇按77:23比例进行等度洗脱。

然而，在应用过程中发现，药典方法存在的缺陷为：等度洗脱的方式使得强极性杂质无保留，弱极性杂质不能被完全洗脱。为兼顾各杂质极性，需使用梯度洗脱的方式，在洗脱过程中逐渐增加有机相比例，但是随着有机相比例的增加，流动相中高浓度的甲酸铵与己烷磺酸钠会盐析，对色谱柱及仪器造成损害。其他一些非药典方法中，为了提高分离效果，也会使用一些损害色谱柱的溶剂，例如三乙胺。

发明内容

发明人研究表明：在硫酸特布他林合成工艺中可能产生极性差异很大的工艺杂质，包括但不限于：

等度洗脱的方式使得强极性杂质无保留，弱极性杂质不能被完全洗脱。为了较好地实现强极性杂质的保留及弱极性杂质的有效洗脱，同时还能够降低溶剂对色谱设施的损害，本发明提供一种不含有离子对试剂己烷磺酸钠以及三乙胺的液相色谱检测方法。

具体的，本发明提供了一种用于检测硫酸特布他林中有关物质的方法，所述有关物质至少包括TBS4-Z5：

它采用高效液相色谱进行检测，包括如下内容：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱

流动相：由流动相A和流动相B组成，所述流动相A为甲酸铵缓冲液，用三氟乙酸调节pH值至2.5-3.5；流动相B为甲醇或/和乙腈；其洗脱程序的0-50分钟梯度如下：

本发明所述色谱柱尺寸可以使用常规尺寸，本发明所述色谱柱长度为50～250mm，内径为2.1～4.6mm，填料的粒径为3～5μm。例如，长度为250mm，内径4.6mm，粒径5μm。

其中，所述流动相A是甲酸铵缓冲液，所述缓冲液中，甲酸铵浓度为0.04mol/L～0.06mol/L，优选为0.05mol/L。取适当浓度的甲酸铵溶液，三氟乙酸调节pH制得。pH值为2.5～3.5，进一步可以选择2.8～3.2，例如3.0。

所述流动相B主要包括甲醇或/和乙腈。可以主要是甲醇。

本发明所述柱温、流速、检测波长等参数可以在常见范围内选择。检测波长选自210～400nm，具体为276nm；流动相流速选自0.8ml/min～1.2ml/min，具体为1.0ml/min；柱温选自38～42℃，具体为40℃。

本发明检测方法中，还包括其他常规步骤：