[发明专利]一种东方桤木组培快繁方法

说明书

本发明涉及植物组织培养技术领域，更具体而言，涉及一种东方桤木组培快繁方法，通过运用植物组织培养技术，采用茎段的腋芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基解决了对东方桤木进行大规模培养的问题。该方法不定芽最高的诱导率为71.6％，生根率为75％，采用蛭石为介质的试管苗移栽省去洗培养基这一步骤，减少根系损伤，成活率达95％以上，对东方桤木的规模化育苗有现实的意义。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，更具体而言，涉及一种东方桤木组培快繁方法。

背景技术

东方桤木属桦木科桤木属，乔木，高达10-15m，材质软，可供一般建筑，制作家具及器具用材；果序、叶和树皮含糅质，可提取栲胶或作染料，又因其含单宁，入药可消炎止血；最重要的是与放线菌形成根瘤，起到固氮的作用，可作为先锋树种改善土壤肥力，用于荒山绿化。东方桤木分布于西里西亚，土耳其南部，叙利亚西北部等地，获得其种子和苗木来源困难，缺乏能应用的种苗。植物组织培养繁殖技术能够在短时间内获得大量苗木，满足市场需求，但目前关于东方桤木组织培养方面的研究尚未见报道。

发明内容

为了克服现有技术中所存在的不足，本发明提供一种东方桤木组培快繁方法，通过运用植物组织培养技术，可以在短期内获得大量优质的试管苗，易于实现大规模的工厂化生产，解决东方桤木种苗少的问题。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种东方桤木组培快繁方法，包括以下步骤：

S1、外植体准备：选取温室内盆栽东方桤木当年生带腋芽的茎段或茎尖为外植体，表面清洗、消毒后用HgCl₂浸泡，无菌水冲洗备用；

S2、初代培养：将外植体接种于培养基中培养诱导不定芽，培养条件为：22-25℃、光照强度1800-2500Lux、光周期为14h/d，待其不定芽萌发后进行继代培养；

S3、继代培养：将达到继代要求的芽丛切成小丛接种于继代培养基中，培养条件为：22-25℃、光照强度1800-2500Lux、光周期为14h/d，培养20-25d得到芽苗；

S4、生根培养：将S3培养的芽苗取单苗置于生根培养基中培养，培养条件为：22-25℃、光照强度1800-2500Lux、光周期为14h/d，培养20d生根得到试管苗；

S5、炼苗：待S4培养的试管苗根长到1-2cm时，将组培盒放置炼苗室3d，准备移栽；

S6、移栽：取出S5培养的小苗移栽入移栽基质中，放入温室内的小拱棚，拱棚湿度保持在75％-85％、温度20-25℃，移栽一周后逐渐打开小拱棚，20d后进入常规管理。

进一步地，步骤S1中所述外植体清洗消毒具体为：将外植体剪去叶片并切割成2-3cm的小段，用洗衣粉水浸泡15min，然后用自来水冲洗1h，置于超净工作台内，先用75％酒精表面消毒1min，无菌水冲洗3次。

进一步地，步骤S1中所述HgCl₂采用0.1％HgCl₂，浸泡时间为3min，无菌水冲洗5次。

进一步地，步骤S2中所述培养基以WPM培养基为基本培养基，添加0.3-1.0mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.01mg/L的吲哚丁酸、30g/L的蔗糖、6g/L的琼脂，PH为5.8-6.5。

进一步地，步骤S3中所述继代培养基以WPM培养基为基本培养基，添加0.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.01mg/L的吲哚丁酸、30g/L蔗糖、6g/L琼脂，PH为5.8-6.5。