[发明专利]一种用于抗病促生的多菌融合共生发酵工艺

权利要求书

1.一种用于抗病促生的多菌融合共生发酵工艺，其特征在于：包括如下步骤：

步骤（1）、制备菌液：将活化后的多粘类芽孢杆菌接入至培养基A中，摇匀、培养，制得多粘类芽孢杆菌液；将活化后的酵母菌接入至培养基B中，摇匀、培养，制得酵母菌液；将活化后的嗜热链球菌接入至培养基C中，摇匀、培养，制得嗜热链球菌液；

步骤（2）、融合共生发酵：往发酵设备中加入发酵培养基，控制发酵培养基pH值为7.0-7.2、温度为35-37℃，边搅拌发酵培养基边加入多粘类芽孢杆菌液，继续搅拌，发酵24-36h后得到发酵液A；然后控制体系pH值为6.0-6.5、温度为35-37℃，边搅拌发酵液A边加入酵母菌液，继续搅拌，发酵45-50h后得到发酵液B；再控制体系pH值为5.0-5.5、温度为30-32℃，边搅拌发酵液B边加入嗜热链球菌液，继续搅拌，发酵3-4天后得到多菌融合共生发酵液；

所述步骤（1）中，培养基A通过如下步骤制得：称取1-5g牛肉膏、8-12g蛋白胨、3-8g氯化钠和15-25g琼脂，加入至蒸馏水中，混合均匀，并补充蒸馏水至体系为1000mL，调节pH值至7.0-7.3，然后在温度为118-123℃、压强为0.08-0.12MPa的条件下灭菌28-32min，制得培养基A；

所述步骤（1）中，培养基B通过如下步骤制得：称取180-220g土豆滤液、18-22g葡萄糖和15-25g琼脂，加入至蒸馏水中，混合均匀，并补充蒸馏水至体系为1000mL，然后在温度为118-123℃、压强为0.08-0.12MPa的条件下灭菌28-32min，制得培养基B；

所述步骤（1）中，培养基C通过如下步骤制得：称取8-12g蛋白胨、8-12g牛肉浸取物、3-8g酵母提取物、18-22g葡萄糖、3-8g乙酸钠、1-3g柠檬酸二胺、0.8-1.2g吐温-80、1.5-2.5g磷酸氢二钾、0.5-0.6g硫酸镁、0.20-0.30硫酸锰、18-22g碳酸钙和15-25g琼脂，加入至蒸馏水中，混合均匀，并补充蒸馏水至体系为1000mL，然后在温度为118-123℃、压强为0.08-0.12MPa的条件下灭菌28-32min，制得培养基C；

所述步骤（2）中，发酵培养基通过如下步骤制得：称取1-3g红糖、1-3g玉米淀粉、1.5-2.5g磷酸二氢钾、8-12g蛋白胨、3-8g酵母粉、1-5g牛肉膏、18-22g葡萄糖、1-2g微量元素、1-2g生长因子、1-2g维生素加入至蒸馏水中，混合均匀，并补充蒸馏水至体系为1000mL，然后在温度为115-125℃、压力为0.10-0.15MPa的条件下蒸汽灭菌30-40min，制得发酵培养基；

所述步骤（2）中，加入多粘类芽孢杆菌液时，发酵设备中加入发酵培养基后，供氧至发酵设备中，控制发酵培养基的溶氧量占发酵培养基体积的8-12%，然后在转速为150-180rpm条件下边搅拌边加入多粘类芽孢杆菌液；

加入酵母菌液时，供氧至发酵设备中，控制体系的溶氧量占发酵液A体积的5-10%，然后在转速为150-180rpm条件下边搅拌边加入酵母菌液；

加入嗜热链球菌液，供氧至发酵设备中，控制体系的溶氧量占发酵液B体积的5-10%，然后在转速为50-80rpm条件下边搅拌边加入嗜热链球菌液。

2.根据权利要求1所述的一种用于抗病促生的多菌融合共生发酵工艺，其特征在于：所述发酵培养基中多粘类芽孢杆菌液的接种量为发酵培养基体积的2-5%，发酵液A中酵母菌液的接种量为发酵液A体积的2-5%，发酵液B中嗜热链球菌液的接种量为发酵液B体积的2-5%。