[发明专利]一种核酸的提取方法以及用于核酸提取的试剂盒

说明书

本发明公开了一种核酸的提取方法以及用于核酸提取的试剂盒，涉及核酸提取技术领域，该提取方法包括采用裂解液对样本进行裂解，裂解液包括工作浓度为0.5～6M的强离子性离液盐、工作浓度为0.5v/v％～10v/v％的表面活性剂、工作浓度10v/v％～50v/v％的醇溶液；该裂解液在无需采用蛋白酶K的情况下，即可有效稳定地裂解样本，且裂解过程无需加热，在常温反应的条件下即可完成核酸的有效提取，此外，该提取方法通过在裂解样本时加入磁珠，实现裂解和结合一步完成，在保证提取质量的同时，提高了提取效率，简化了操作流程。

技术领域

本发明涉及核酸提取技术领域，具体而言，涉及一种核酸的提取方法以及用于核酸提取的试剂盒。

背景技术

核酸是遗传信息的载体，是非常重要的生物信息分子，也是分子生物学研究的主要对象，因此，核酸的提取质量将直接关系到实验的成败。

核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子分开。在分离核酸时，一方面需要保证核酸结构的完整性，因为完整的一级结构是核酸结构和功能研究的基本要求，另一方面也需要尽量排除其他分子的污染，保证核酸样本的纯度。

在现有提取核酸的技术中，通常采用蛋白酶K用于消化蛋白质，以释放核酸，若不添加蛋白酶K的话，核酸释放不充分，提取的核酸中容易出现蛋白污染。蛋白酶K是一种高活性的丝氨酸蛋白酶，但是使用蛋白酶K的应用条件尚未统一的标准，提取试剂中的各种溶剂和各种条件均可能对蛋白酶K的活性造成影响，导致核酸提取的障碍。且蛋白酶K的反应温度为50～65℃作用，需要进行加热处理，增加了核酸提取的流程，且核酸提取的效率和稳定性较低。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种核酸的提取方法以及用于核酸提取的试剂盒。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供了一种核酸的提取方法，其包括采用裂解液对样本进行裂解；所述裂解液包括以下组分：工作浓度为0.5～6M的强离子性离液盐、工作浓度为0.5～10v/v％的表面活性剂、工作浓度10～50v/v％的醇溶液。

第二方面，本发明实施例提供了一种用于核酸提取的试剂盒，应用于前述实施例所述的核酸的提取方法，其包括组成裂解液的以下试剂：强离子性离液盐、表面活性剂和醇溶液。

本发明具有以下有益效果：

通过对裂解液的成分配比以及裂解条件进行改进，在无需采用蛋白酶K的情况下，能够有效稳定地裂解样本(尤其是针对病毒核酸)，且裂解过程无需加热，在常温的反应条件下即可完成核酸的有效提取，且提取的核酸质量好，重复性好。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为实施例1中核酸提取的流程示意图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

本发明实施例提供了一种核酸的提取方法，其包括采用裂解液对样本进行裂解；所述裂解液包括以下组分：工作浓度为0.5～6M的强离子性离液盐、工作浓度为0.5～10v/v％的表面活性剂、工作浓度10～50v/v％的醇溶液。

本文中的“强离子性离液盐”可使细胞裂解，蛋白质和多糖沉淀，破坏细胞的完整结构。