[发明专利]检测SNF5基因表达的试剂在制备动脉粥样硬化诊断产品中的应用

说明书

本发明属于医学技术领域，具体涉及检测SNF5基因表达的试剂在制备动脉粥样硬化诊断产品中的应用。本发明通过检测SNF5在Hcy促进动脉粥样硬化炎症过程中的表达水平，在体外合成SNF5过表达慢病毒和SNF5小RNA干扰片段，研究其对动脉粥样硬化过程中IL‑1β的影响，阐明了在Hcy促进动脉粥样硬化炎症过程中SNF5的作用。本发明涉及的SNF5在Hcy促进动脉粥样硬化炎症过程中具有重要作用，为以后从分子水平诊断动脉粥样硬化提供了理论依据，具有重大的理论意义和潜在的实用价值。该方法简单易行，容易推广。

技术领域

本发明涉及本发明属于医学技术领域，具体涉及检测SNF5基因表达的试剂在制备动脉粥样硬化诊断产品中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化(atherosclerosis)是由损伤或生化刺激等因素作用于动脉管壁引起的、涉及多细胞、多因素、多环节的慢性全身性疾病，主要累及大、中动脉，受累血管壁出现脂质积聚、细胞外基质蛋白沉积、动脉内膜钙化，导致动脉弹性下降、管腔狭窄，还可能导致动脉血栓的形成甚至破裂，严重危害着人类的身体健康。概括起来，研究人员关于动脉粥样硬化发病机制的观点主要有炎症反应学说、平滑肌克隆增殖学说、血管损伤反应学说、血栓镶嵌学说以及其他学说等。目前已有大量证据支持炎症反应在动脉粥样硬化发病机制中的重要地位，然而炎症反应具体环节的整体协调及其相互作用机制仍未阐明。

动脉粥样硬化是工业化社会中死亡和严重疾病的主要原因之一，它正在成为全球性的健康问题。同型半胱氨酸(Hcy)是动脉粥样硬化的独立危险因素，它通过多种机制的协同作用参与炎症反应。动脉粥样硬化的发病机理与炎症分子有关，包括细胞因子白介素-1β(IL-1β)，细胞因子白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。其中，IL-1β在广泛的炎性疾病(包括动脉粥样硬化及其并发症)中起关键作用。然而，在由Hcy引起的动脉粥样硬化发生和发展过程中引起IL-1β水平升高的机制仍不清楚。

开关/不可发酵蔗糖(SWI/SNF)是一种进化上保守的多亚基染色质重塑复合物，可调节表观遗传结构和细胞特性。最近，SWI/SNF复合物在癌症中的作用变得更加明显，并已被确定为癌症中最频繁突变的染色质调节复合物。人类对各种癌细胞的基因组测序显示出SWI/SNF因子特别是SNF5的频繁突变，SWI5是SWI/SNF复合体的亚基之一，通过控制染色质动力学在调节基因表达中起着关键作用。作为一种有效的，真正的肿瘤抑制基因，许多研究表明，SNF5在多种癌症中的表达突变或缺失，包括横纹肌瘤，前列腺癌，透明细胞肾细胞癌和结肠癌。此外，研究表明SNF5可以调控众多与癌症相关的基因。例如，SNF5可以通过RB介导的E2F靶基因(包括细胞周期蛋白A和E2F113)的阻遏来调节细胞周期。这些发现共同强调了SNF5的抑癌作用，并说明了SWI/SNF在维持人类肿瘤中的致癌基因表达程序中的功能。但是目前针对SNF5在动脉粥样硬化的发生机制中的作用尚未阐明。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明的目的之一是提供检测SNF5基因表达的试剂在制备动脉粥样硬化诊断产品中的应用。

进一步的，所述试剂包括：通过qRT-PCR、western blot和免疫荧光法检测SNF5基因表达水平的试剂。

更进一步的，所述qRT-PCR检测SNF5基因表达水平的试剂至少包括一对特异性扩增SNF5基因的引物。

本发明的目的之二是提供利用所述的SNF5基因评价基于炎症反应的抗动脉粥样硬化药效的方法，其包括如下步骤：

S1、用Hcy处理人THP-1单核源性巨噬细胞；

S2、Hcy处理的人THP-1单核源性巨噬细胞的培养体系中加入受试药物，培养48h；

S3、检测以下项目作为受试药物药效评价指标：检测SNF5的mRNA及蛋白表达水平。