[发明专利]从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法

说明书

本发明涉及一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，所述方法包括如下步骤：取显齿蛇葡萄叶和水，以料液比为1：(25～35)混合；采用80℃～98℃的温度对混合所得体系进行加热回流提取0.4h～0.6h，收集提取液。与现有技术相比，本发明具备如下有益效果：采用传统方法从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素，提取率非常低本发明的发明人意外地发现，在从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的过程中，通过采用加热回流的方式并配合调整料液比以及加热回流条件，能够大幅度提升二氢杨梅素的提取率。

技术领域

本发明涉及中药有效成分提取技术领域，特别是涉及一种从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法。

背景技术

显齿蛇葡萄叶，来源于葡萄科(Vitaceae)蛇葡萄属(Ampelopsis Michx.)的显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz)W.T.Wang)，产地众多，主要分布于我国湖北、湖南、重庆、贵州、广西、福建等长江以南地区，是近年来研究较多的药茶两用中药之一。将显齿蛇葡萄的嫩茎叶晒干后，茶叶色绿起白霜，俗称藤茶，开水冲泡后其味微苦甘长，民间已有近千年的饮用历史，常用于肝火过盛、咽喉炎、心脑血管疾病等的防治。其中，二氢杨梅素是其最主要的活性成分，含量可高达30％以上。现代科学研究表明，二氢杨梅素具有清除自由基、提升机体免疫力、抗肿瘤、保护神经、调节血脂以及保肝护肝等多种生物活性，是显齿蛇葡萄叶多种健康促进功能的物质基础。二氢杨梅素的药理功效显著，作用独特，具有很好的临床应用与产品开发的前景。

传统的从显齿蛇葡萄叶中提取二氢杨梅素的方法，例如：

一种快速提取显齿蛇葡萄叶中高纯度二氢杨梅素的方法，包括如下步骤：

(1)粉碎：干叶，粉碎至10目～20目；(2)浸洗：放入水中，料液质量体积比为1:100(g/mL)，常温浸泡6小时；(3)提取：重新加水，95℃提取60分钟，并趁热分离提取液；(4)结晶：室温或制冷冷却提取液，于4℃～10℃促进结晶，过滤获得粗品；(5)重结晶：加沸水至粗品全部溶解，重结晶，滤母液，获得产品。

一种提高显齿蛇葡萄中二氢杨梅素得率的方法，由以下步骤组成：(1)采摘重庆酉阳显齿蛇葡萄鲜叶，并将显齿蛇葡萄叶在温度为100℃条件下烘烤1h；

(2)将取烘干处理的显齿蛇葡萄粉碎，过40目筛，得到显齿蛇葡萄粉末，备用；

(3)称取100g的显齿蛇葡萄粉末加入到2000mL体积分数为95％的乙醇溶液中，超声提取30min，滤过得到二氢杨梅素提取液；(4)将步骤(3)制备得到二氢杨梅素提取液置于旋转蒸发仪中，温度为50℃水浴中减压浓缩，回收乙醇至无醇味，加1000mL沸水溶解，置于4℃低温环境下放冷析晶，滤过，60℃烘干滤饼即为二氢杨梅素提取物。

一种从显齿蛇葡萄叶中分离纯化二氢杨梅素的方法，依照以下步骤：(1)显齿蛇葡萄干叶粉碎后过20目筛，加入浓度为40％～80％乙醇水溶液，料液比为显齿蛇葡萄叶(重量kg)：乙醇水溶液(体积L)＝1:20，在室温条件下搅拌提取60min，经常规过滤获得提取液；(2)提取液依次通过微滤一级膜和超滤二级膜，得到纯化提取液；(3)将步骤(2)所得纯化提取液经温度为60℃真空浓缩，回收乙醇，得到浓缩液；(4)将步骤(3)所得浓缩液用盐酸调节pH至2～3，置于室温条件下静置48h，过滤收集沉淀；(5)将步骤(4)所得沉淀用95％乙醇加热溶解后经微滤一级膜除去不溶杂质，往滤液中加入4倍～10倍体积的水后，用盐酸调节pH至2～3并置于室温条件下静置48h，过滤收集沉淀；(6)将步骤(5)所得沉淀用90℃热水充分搅拌后溶解，保温静置2h～4h，上层清液经常规过滤后，用盐酸调节pH至2～3并置于室温条件下静置48h，过滤收集沉淀，干燥后即得到二氢杨梅素纯品。