[发明专利]夜来香花叶病毒纳米酶免疫层析试纸条及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种夜来香花叶病毒纳米酶免疫层析试纸条及其制备方法和应用。本发明首先保护一种多肽(CP多肽)，如序列表的序列1所示。本发明还保护序列表的序列2所示的多肽。本发明还保护与CP多肽或序列表的序列2所示的多肽特异结合的抗体(命名为CP抗体)。本发明还保护CP抗体与纳米酶的偶联复合物。本发明还保护一种检测夜来香花叶病毒的试纸条，其检测垫上具有T线和C线，T线上包被CP抗体。本发明还保护一种用于检测夜来香花叶病毒的试剂盒，包括所述试纸条和以上任一所述偶联复合物。本发明以夜来香花叶病毒为研究对象，开发了纳米酶免疫层析试纸条，可用于夜来香花叶病毒的检测。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种夜来香花叶病毒纳米酶免疫层析试纸条及其制备方法和应用。

背景技术

西番莲(Passiflora caerulea L.)又名百香果，是西番莲科(Passiflora ceae)西番莲属(Passiflora L.)的多年生常绿藤本植物，其果实营养价值高，甜度高、酸度低，具有“饮料之王”的美誉，在饮料市场占有重要地位。近年来，随着国内消费者对西番莲需求的不断增长，我国台湾、广东、福建、广西、浙江、四川等地区大规模种植西番莲。然而，西番莲病毒病病害的发生，导致西番莲种质退化，产量和品质下降，严重阻碍了我国西番莲产业的发展。随着我国的西番莲种植面积增大，病毒病传播和扩散的风险也越来越高。加强病毒的早期检测，明确病毒发生的种类，对及时预防与控制西番莲病毒病具有重要意义。

目前在西番莲植株上发现的病毒主要有黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)、东亚西番莲病毒(East Asian Passiflora virus，EAPV)、西番莲斑驳病毒(Passionfruit mottle virus，PaMV)、广东番木瓜曲叶病毒(Papaya leaf curlGuangdong virus，PaLCuGdV)、大戟曲叶病毒(Euphorbia leaf curl virus，ELCV)和夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus，TeMV)。其中，TeMV是马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属成员，基因组为正义单链RNA，全长9689nts，病毒粒体呈线状，长约750nm，宽约12nm。TeMV在西番莲上可导致叶片呈花叶状，严重影响植株正常生长。

目前用于病毒检测的方法主要有鉴别寄主法、电子显微镜观察法、RT-PCR法、试纸条检测等方法。鉴别寄主法需要隔离种植的指示植物，鉴定周期长，且及易受环境条件的影响。电镜观察和RT-PCR检测需要昂贵的仪器，并对操作的专业技术人员有较高的要求，其应用局限于实验室。试纸条检测方法具有样品处理简单、可大批量操作和无需特殊设备的特点，被广泛应用于病毒病的检测。针对TeMV的试纸条检测，并没有相关方法的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种夜来香花叶病毒纳米酶免疫层析试纸条及其制备方法和应用。

本发明首先保护一种多肽(夜来香花叶病毒的CP多肽，简称CP多肽)，如序列表的序列1所示。

本发明还保护序列表的序列2所示的多肽。

本发明还保护与CP多肽或序列表的序列2所示的多肽特异结合的抗体(命名为CP抗体)。

所述CP抗体可为以CP多肽为免疫原得到的抗体。

所述CP抗体也可为以CP多肽与载体蛋白的偶联物为免疫原得到的抗体。

所述CP抗体可为以序列表的序列2所示的多肽为免疫原得到的抗体。

所述CP抗体也可为以序列表的序列2所示的多肽与载体蛋白的偶联物为免疫原得到的抗体。

所述抗体具体可为多克隆抗体。

所述CP抗体具体可为以CP多肽为免疫原免疫动物得到的多克隆抗体。