[发明专利]CDH11截短型变体及其应用

说明书

本发明涉及一种CDH11截短型变体及其应用，CDH11截短型变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明根据CDH11的分子结构和作用特点，发明并制备了仅含有CDH11胞外段的截短型变体，一系列实验结果显示该截短型变体能浓度依赖性地抑制CDH11的功能，具有降低食管鳞癌细胞增殖的能力，显示出抗肿瘤效应。该截短型变体干扰细胞间CDH11蛋白的相互作用，进而影响到CDH11蛋白介导的细胞增殖等功能，可用作CDH11蛋白的抑制剂，并用于制备癌症的治疗药物。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种CDH11截短型变体及其应用。

背景技术

钙粘蛋白代表一类细胞粘附分子(cell adhesion molecules，CAM)，其通过形成细胞间连接或粘附连接(AJ)来介导细胞之间的Ca²⁺依赖性嗜同性相互作用。钙黏蛋白的表达具有组织特异性，神经元细胞主要表达N-钙粘蛋白(CDH2)，而上皮细胞高度表达E-钙粘蛋白(CDH1)，VE-钙粘蛋白(CDH5)在内皮细胞中表达，OB-钙粘蛋白(CDH11)在成骨细胞中表达。通过形成同型二聚体，钙粘蛋白以拉链样结构聚集，而它们的细胞内结构域与α-连环蛋白和β-连环蛋白相互作用并锚定到肌动蛋白细胞骨架。这些相互作用在维持组织结构和细胞极性，以及限制细胞运动和增殖等方面发挥作用。

不同的钙黏蛋白在癌症的发生和发展中起着不同的作用。大量研究表明CDH1具有很强的抑制癌细胞侵袭和转移的能力，这可能与CDH1能结合β-连环蛋白并抑制后者向细胞核的移位从而减弱Wnt信号途径有关。与此相反，CDH3则在结肠癌、乳腺癌、甲状腺癌、胰腺癌等肿瘤中高表达，在甲状腺癌和胰腺癌细胞中下调或阻断CDH3能抑制肿瘤细胞的迁移和增殖能力。Cadherin-11(CDH11，OB-钙粘蛋白)基因是位于人染色体16q22.1上，其编码产物含有796个氨基酸，分子量约为88kDa。同钙黏蛋白家族的大多数成员类似，CDH11为单次跨膜蛋白，其胞外段为5个连续的EC结构域(Extracellular Cadherin domain)，从N-端开始依次记为EC1-EC5。两个细胞表面的CDH11分子的EC1结构域中的一段β-折叠可以相互交换嵌入形成同二聚体。相邻细胞上许多这样的CDH11同二聚体组成拉链样结构从而形成稳定的粘附作用，使得CDH11在细胞增殖、迁移、分化和组织形态建成等过程中发挥重要功能。尽管有少数研究指出敲低CDH11的表达可以促进胃癌细胞的迁移能力，但是更多的研究指出CDH11是一个促癌基因。例如，Satriyo等发现在三阴性乳腺癌和基底型(Basal-like)乳腺癌中，高表达CDH11的患者总体生存期更短。Birtolo等发现在胰腺癌中CDH11高表达，并且在胰腺癌细胞中敲低CDH11的表达能降低癌细胞的迁移能力。Chu等发现CDH11在前列腺癌中高表达并且能促进癌细胞向骨的转移。发明人的研究结果也表明CDH11在食管鳞癌组织中高表达，且其表达水平与患者总体生存期呈负相关。Lee等制备了能特异性结合CDH11的小鼠单克隆抗体，动物实验结果显示这种单克隆抗体能抑制前列腺癌细胞向骨的转移。这些大量的研究表明在许多类型肿瘤中抑制CDH11的表达或阻断其功能有望成为一种可行的治疗方法，但是目前缺乏能用于人体的、可有效地抑制或阻断CDH11蛋白功能的药物。

发明内容

基于此，有必要提供一种能够应用于人体的、有效地抑制或阻断CDH11蛋白功能的分子。

一种CDH11截短型变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明还提供了一种核酸分子，其编码如上所述的CDH11截短型变体。

在其中一个实施例中，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

本发明还提供了一种重组载体，所述重组载体含有如上所述的核酸分子。

在其中一个实施例中，所述重组载体基于pCDH-CMV-MCS-EF1-puro构建得到。

本发明还提供了一种宿主细胞，其基因组中掺有如上所述的核酸分子。