[发明专利]一种递送蛋白药物的骨靶向MOFs纳米递药载体的制备方法

说明书

本发明公开一种递送蛋白药物的骨靶向MOFs纳米递药载体的制备方法，以阿仑膦酸钠(ALN)为骨靶向配体，以透明质酸(HA)为主动靶向配体，包载蛋白质药物(如细胞色素C，Cyt C)，构筑了一种递送蛋白质药物的骨靶向MOFs纳米载体。本发明制备方法中的纳米递药载体具有良好的血清稳定性，能够在酸性条件下快速释药，对蛋白质药物有较好的保护作用，能够将活性蛋白质有效地传递到细胞内部并从溶酶体中逃逸到达所需的细胞内位点的递药载体，该药物递送材料既具有良好的组织相容性，又具有良好的骨靶向性能，可用于作为治疗各种癌症骨转移的蛋白药物载体。

技术领域

本发明涉及一种蛋白质药物载体，具体是一种递送蛋白药物的骨靶向MOFs纳米递药载体的制备方法。

背景技术

蛋白质在新陈代谢、信号传递、能量学、基因调节和免疫反应等多种细胞过程中发挥着重要作用。许多疾病都是由细胞内蛋白质的功能改变或缺乏引起的。蛋白质疗法是将蛋白质导入细胞以代替失调的蛋白质的治疗方法。因此，蛋白质药物在药物研发和疾病的诊断治疗中具有重要的现实意义。蛋白质药物与传统的小分子化学药物相比，具有低毒性、高特异性和高选择性的优点。但是，由于蛋白质的化学本质与传统的小分子化学药物差异较大，包括分子量较大、所带电性复杂、结构不稳定等，在体内递送方面仍存在很多难题，如体内外稳定性差、易被体内蛋白酶降解、强免疫原性等。此外，对于作用靶点在胞内的蛋白质药物，能否被细胞有效内吞、能否完成溶酶体逃逸等问题。因此，开发一种能够将活性蛋白质有效地传递到细胞内部并从溶酶体中逃逸到达所需的细胞内位点的递送系统具有重要的意义。

肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要因素之一，转移位点主要包括骨、肺、肝等组织。其中，由于骨组织特殊的构造和生理微环境，十分适合播散肿瘤细胞的休眠和再激活，使其成为乳腺癌、肺癌、前列腺癌等恶性肿瘤最常见的转移部位之一。使用骨靶向载体递送药物至骨转移病灶已成为开发中重要治疗手段。例如，以双磷酸盐类、酸性寡肽类、四环素类、大环蒽醌类等骨亲和力分子作为靶头的纳米载体已经被报道用于骨转移瘤等骨疾病治疗的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种递送蛋白药物的骨靶向MOFs纳米递药载体的制备方法，通过以MOFs材料为载体，以阿仑膦酸钠(ALN)为骨靶向配体，以透明质酸(HA)为主动靶向配体，包载蛋白质药物，构筑一种递送蛋白质药物的骨靶向MOFs纳米载体；该药物递送材料既具有良好的组织相容性，又具有良好的骨靶向性能，可用于作为治疗各种癌症骨转移的蛋白药物载体。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种递送蛋白药物的骨靶向MOFs纳米递药载体的制备方法，通过以MOFs材料为载体，以ALN为骨靶向配体，以HA为主动靶向配体，包载蛋白质药物，构筑一种递送蛋白质药物的骨靶向MOFs纳米载体。

进一步地，所述MOFs纳米粒包括MOF纳米粒、MOF-Cyt C纳米粒、HA@MOF-Cyt C纳米粒和ALN-HA@MOF-Cyt C纳米粒。

进一步地，所述制备方法的操作步骤包括：

S1、通过酰胺化反应制备骨靶向聚合物ALN-PEG-HA和非骨靶向聚合物CH3O-PEG-HA；

S2、一锅法制备MOFs纳米粒

利用HA所带有的-COOH与Zn²⁺通过静电结合以及配位作用的方式包裹在MOFs纳米粒的表面，制备出HA@MOF-Cyt C纳米粒和ALN-HA@Cyt C纳米粒；

S3、优化MOFs纳米粒的制备条件

设置制备液的不同浓度梯度，通过实验对比，筛选出MOFs纳米粒的最佳制备条件；

S4、观测记录并对纳米粒的包封率和载药量进行测定

S5、不同MOFs纳米粒的体外骨靶向性研究