[发明专利]一种非细胞神经移植物的生物测定方法

权利要求书

1.一种用于进行包含神经内膜管支架的非细胞神经移植物的生物测定的方法，支架中的神经内膜管的内表面包括层粘连蛋白，所述方法包括：

将神经元或神经元组附着到非细胞神经移植物片段的第一端以形成测试结构；

在培养基中培养测试结构一段时间，以允许神经从神经元或神经元组外生长到非细胞神经移植物片段中；

根据以下至少一项对所述测试结构进行分析，以确定外生长神经结构的量：与外生长神经结构相关的一个或多个外周神经结构的长度或靶蛋白的量或用于靶蛋白的mRNA的量；和

至少部分地基于所确定的外生长神经结构的量来确定非细胞神经移植物片段的效力。

2.根据权利要求1所述的方法，其中根据与外生长神经结构相关的一个或多个外周神经结构的长度以及靶蛋白的量或用于靶蛋白的mRNA的量来确定外生长神经结构的量。

3.根据权利要求1所述的方法，其中根据与外生长神经结构相关的两个或多个外周神经结构的长度来确定外生长神经结构的量。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中至少根据一个或多个外周神经结构的长度来确定外生长神经结构的量，并且其中对所述测试结构进行分析包括：

制备用于切片的所述测试结构；

将所述测试结构分割成多个切片，其中所述多个切片中的每一个与垂直于所述第一端的所述非细胞神经移植物片段的一侧间隔预定距离地纵向移除；和

用一种或多种染色剂染色每个切片。

5.根据权利要求4所述的方法，其中制备用于切片的所述测试结构包括固定所述测试结构和石蜡包埋所述测试结构。

6.根据权利要求4所述的方法，其中所述一个或多个染色剂中的一个染色剂选自由βIII-微管蛋白、PGP9.5和S100抗体组成的组。

7. 根据权利要求1或2所述的方法，其中至少根据一个或多个外周神经结构的长度来确定外生长神经结构的量，并且其中，对所述测试结构进行分析包括：

用扩散张量成像扫描全部或部分测试结构并产生示踪成像图像，其中由示踪成像图像识别外生长神经结构；和

从示踪成像图像中定量外生长神经结构的量。

8.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述神经元或神经元组是背根神经节（DRG）外植体。

9.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中对所述测试结构进行分析包括测定以确定与所述外生长神经结构相关的靶蛋白的量。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述靶蛋白选自由βIII-微管蛋白、S100和GAP-43组成的组。

11.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述外生长神经结构是神经突或许旺细胞。

12.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，进一步包括：在将所述神经元或神经元组附着到所述神经移植物片段上之前，钝化所述非细胞神经移植物片段。

13.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述培养时间为约3天至约7天。

14.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中将所述神经元或神经元组附着到所述非细胞神经移植物片段上包括：用胶原蛋白凝胶将所述神经元或神经元组与所述非细胞神经移植物片段固定。

15.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述非细胞神经移植物片段取自人体组织。

16.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述非细胞神经移植物片段取自动物组织。