[发明专利]一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明使用实时荧光定量交叉引物等温扩增技术检测新型冠状病毒，设计了两组适用于这一技术的引物。两组引物分别针对型冠状病毒基因组中的ORF1ab基因和型冠状病毒基因组中的S基因进行检测。本发明新型冠状病毒核酸检测试剂盒特异性强，灵敏度高，不仅可以对样品进行定性定量的检测，还可以实时观测数据的变化，有利于对样品数据的全面收集，方便进行下一步的研究。因此本发明不仅适用于现场快速检测，还适用于以科研为目的的检测。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种新型冠状病毒核酸检测试剂盒。

背景技术

冠状病毒(Coronavirus，CoV)是一类具有囊膜，基因组为线性单股正链的RNA病毒，是自然界广泛存在的一大类病毒。冠状病毒分为α、β、γ和δ共4个属，其中α和β冠状病毒可以感染哺乳动物，而γ和δ冠状病毒主要感染鸟类。此前已经发现有6种冠状病毒可感染人类：α冠状病毒(HCoV-229E、HCoV-NL63)和β冠状病毒(HCoV-HKU1，HCoV-OC43、MERS-CoV、SARS-CoV)，患者表现从普通感冒到重症肺部感染。新型冠状病毒(严重急性呼吸综合征冠状病毒2，SARS-CoV-2)是一种先前尚未在人类中发现的β属冠状病毒，在人群中具有极强的传染性，主要通过呼吸道飞沫、呼吸道分泌物和直接接触传播。COVID-19患者通常表现出特定的相似症状，例如发烧、全身乏力和咳嗽。大多数患者都表现出轻度的流感样症状，预后良好。但少数患者病情危重，并迅速发展为急性呼吸窘迫综合征、呼吸衰竭、多器官衰竭甚至死亡。

目前病毒的检测方法主要包括病毒分离法、免疫学方法和分子诊断法。病毒分离法耗时长、不能大规模应用于临床快速、准确的检测；免疫学方法(ELISA、抗原抗体检测等)可以快速检出，但灵敏度不足，多在患病后才能检出，比较滞后，不利于筛查，也无法确诊；现代分子生物学诊断方法特异性好、灵敏度高，目前市面上大多采用RT-PCR方法的检测试剂盒。

2019新型冠状病毒传染性强，能引起病毒性肺炎，在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。为了控制疫情，大家都在积极研发相应的诊断试剂盒，但由于新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的发现时间短，对其基因组特征、结构特征、发病机理等方面还在不断的研究当中。目前的新型冠状病毒抗体检测试剂盒，也因研发周期短，检测试剂盒的灵敏度和特异性都有待提高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用实时荧光定量交叉引物等温扩增技术特异、快速、高效地检测新型冠状病毒的试剂盒。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

本发明公开了一种检测新型冠状病毒的引物，包括两组引物，每组引物包含一对剥离引物、一对交叉扩增引物、一对检测引物，分别是：

第一组：

剥离引物：如SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.2所示的反向引物；

交叉扩增引物：如所SEQ ID NO.3示的正向引物和SEQ ID NO.4所示的反向引物；

检测引物：如SEQ ID NO.5所示的正向引物和SEQ ID NO.6所示的反向引物；

第二组：

剥离引物：如SEQ ID NO.7所示的正向引物和SEQ ID NO.8所示的反向引物；

交叉扩增引物：如SEQ ID NO.9所示的正向引物和SEQ ID NO.10所示的反向引物；

检测引物：如SEQ ID NO.11所示的正向引物和SEQ ID NO.12所示的反向引物。