[发明专利]一种荧光定量PCR处理方法和系统

说明书

本申请公开了一种荧光定量PCR处理方法和系统，该方法包括：对待测样品进行扩增；控制光源发出多种波长互不相同的光，其中，不同波长的光的发射时间不同；根据不同波长的光的发射时间控制拍摄设备进行拍摄，拍摄设备拍摄的对象为不同波长的光激发扩增后的待测样品上出射的荧光；根据拍摄设备拍摄得到的图像进行分析。通过本申请解决了相关技术中多重PCR检测仪器设计复杂导致的成本过高甚至无法实现的问题，实现了在较低成本的基础上进行PCR检测。

技术领域

本申请涉及到生物领域，具体而言，涉及一种荧光定量PCR处理方法和系统。

背景技术

聚合酶链式反应(PCR)作为一种能够在短时间内体外大量扩增特定DNA片段的分子生物学技术，已在生物医学监测、疾控筛查等领域中起到重要应用。通过PCR扩增后的琼脂糖凝胶电泳可实现DNA扩增产物的定性分析。

随着定性定量DNA检测需求的增长，实时荧光定量PCR技术因其能够精准、高灵敏度、特异性强、简便而且能定量对病毒进行检测而得到人们的青睐。它主要通过引入特异性探针和荧光信号的动态监测，从而实现对PCR进程的实时定量检测。

随着新型冠状病毒的出现，有一部分患者初次检测为阴性，但最终确诊为新冠病毒感染患者。实时荧光定量PCR准确率受到极大的挑战。利用多重PCR在一个反应体系中加入多对特异性引物，针对多个模板扩增多个目的片段的PCR技术，具有准确率高、节约时间、降低成本和提高效率的特点。提高荧光定量PCR检测的灵敏度、特异性以及抗干扰性。

但目前已经处于研制状态的检测仪器结构复杂，仪器整体较大，成本高昂，且对光学元件的性能要求特别高，几乎无法实现。

发明内容

本申请实施例提供了一种荧光定量PCR处理方法和系统，以至少解决相关技术中多重PCR检测仪器设计复杂导致的成本过高甚至无法实现的问题。

根据本申请的一个方面，提供了一种荧光定量PCR处理方法，包括：对待测样品进行扩增；控制光源发出多种波长互不相同的光，其中，不同波长的光的发射时间不同；根据不同波长的光的发射时间控制拍摄设备进行拍摄，其中，所述拍摄设备拍摄的对象为所述不同波长的光激发扩增后的所述待测样品出射的荧光；根据所述拍摄设备拍摄得到的图像进行分析。

进一步地，所述不同波长的光激发扩增后的所述待测样品上出射的荧光通过同一通道到达所述拍摄设备。

进一步地，所述不同的波长的光被第一预定角度反射到扩增后的所述待测样品上；和/或，所述荧光被第二预定角度反射到所述拍摄设备上，所述第一预定角度和所述第二预定角度相同或者不同。

进一步地，所述不同的波长的光被反射后入射到所述待测样品的入射角度值是根据所述光源倾斜角、以及所述光源同放置所述待测样品的微流控芯片之间距离得到。

进一步地，所述方法还包括：在所述光源发出所述多种波长互不相同的光之后，在所述多种波长互不相同的光到达所述待测样品之前，对所述多种波长互不相同的光进行第一带通滤波，其中，所述第一带通滤波用于过滤掉除所述多种波长之外的其余波长的光；和/或，在所述荧光到达所述拍摄设备之前，对所述荧光进行第二带通滤波和/或汇聚，其中，所述第二带通滤波用于过滤掉除所述荧光的波长之外的其余波长的光，所述汇聚用于将所述荧光聚焦到所述拍摄设备的感光面。

进一步地，所述方法还包括：同一波长光源下，同时采集在相匹配的信号接收带宽与发生串扰的信号接收带宽分别激发所述待测样品所发射的荧光强度，根据采集得到的荧光强度进行统计，得到荧光强度的规律；在发生串扰的带宽中，将串扰信号作为背景光，根据所述规律设定荧光信号阈值，以排除荧光串扰。

进一步地，所述多种波长互不相同的光为三种或者三种以上。