[发明专利]用于检测糯玉米waxy基因的功能性分子标记及应用

权利要求书

1.用于检测糯玉米waxy基因的功能性分子标记，其特征在于：所述功能性分子标记所采用的引物序列为：

FMwx1F: CACGGCATCTACAGGGACG；

FMwx1R: GATGTTGTGGATGCAGAAAGC。

2.如权利要求1所述的用于检测糯玉米waxy基因的功能性分子标记的应用，其特征在于：可用于鉴定糯玉米自交系。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：采用PCR加电泳的方法来检测差异，包括如下步骤：

S1、利用FMwx1F和FMwx1R进行PCR扩增

配置PCR反应体系：2×Taq PCR Mix 15μL；ddH2O 13μL；FMwx1F 0.5μL；FMwx1R 0.5μL；DNA模板1μL；

配置完成后，在 PCR 仪上进行如下的反应程序：预变性95℃5min，使模板充分变性，然后进入PCR扩增循环，每个循环先95℃变性30s，58℃复性30s，72℃延伸1min；循环 35次后，4℃保存，完成PCR的扩增；

S2、利琼脂糖凝胶电泳进行PCR产物的检测；

将PCR扩增后的产物用3%浓度的琼脂糖凝胶分离检测，依次吸取PCR扩增后的产物6µl与1µl 的6×loading buffer溶液混匀后，依次加到点样孔中；在第一个点样孔中加入DNAMarker作为分子量标记，用于检测目的条带的大小；用1×TAE电泳缓冲液进行电泳，设置电压220V，电流150mA，时间45min；电泳结束后，用核酸染料进行染色并在凝胶成像分析系统下检测PCR反应结果并保存胶图。