[发明专利]用于食品中尿素的半定量检测的试剂盒及试纸的制备方法

说明书

本公开描述了用于食品中尿素的半定量检测的试剂盒及试纸的制备方法，其中试剂盒包括试纸和比色卡，试纸包括检测区，检测区具有基层和附在基层的检测组合物，检测组合物是通过将检测组合物的溶液分散于基层而附着于基层的，检测组合物包括脲酶、表面活性剂和指示剂，在基层中，脲酶的含量为0.10～0.40mg/cm²，指示剂的含量为0.03～4.32mg/cm²；其中，表面活性剂为曲拉通X‑100或吐温‑80，曲拉通X‑100在基层中的含量为0.22～2.16mg/cm²，吐温‑80在基层中的含量为1.67～16.7mg/cm²。根据本公开，能够提供一种能够对待测样品进行快速便捷、灵敏度、准确度较高的半定量分析检测的尿素检测的试纸及该试纸的制备方法。

技术领域

本公开大体涉及化学检测领域，具体涉及一种用于食品中尿素的半定量检测的试剂盒及试纸的制备方法。

背景技术

尿素是氨基酸代谢的最终产物，在肝内合成，可自由地从肾小球滤出，40％—50％在肾小球的髓质部被动地重吸收，但当人体内尿素含量超过自身的吸收能力后，将会对人体的肝、肾、肺泡等造成危害。卫生部办公厅关于《食品添加剂使用标准》(GB2760-2011)有关问题的复函，明确指出尿素缺乏食品添加剂工艺必要性，不得作为食品用加工助剂生产经营和使用，但现今社会食品掺杂尿素的问题层出不穷，例如为了提高奶制品的蛋白质含量、为了缩短豆芽生长周期等，因此尿素检测在食品安全和监管等方面具有重要的意义。尿素检测还广泛应用于饮用水和自来水的加工、水产养殖、以及泳池水质检测等行业。

目前，实验室检测尿素较常用方法有对二甲氨基苯甲醛法、酶偶联法、甲酚红法等。对二甲氨基苯甲醛(PDAB)比色法原理是在酸性溶液中尿素与PDAB发生反应，生成柠檬黄色的对二氨基苯甲醛脲，颜色深浅与尿素含量成正比，此法稳定性好，干扰少以及操作简便，是测定常量尿素的良好方法。酶偶联法原理是脲酶分解尿素产生的氨在T-酮戊酸和还原型辅酶I(NADH)的存在下，经谷氨酸脱氢酶(GLDH)催化生成谷氨酸，同时NADH被氧化成氧化型辅酶I(NAD)，NADH在340nm波长处有吸收峰，其吸光度下降的速度与待测样品中尿素的含量成正比，此法优点是特异性高、快速、结果准确精密，是目前测定尿素的首选化学方法。甲酚红法测定尿素的主要原理是尿素在脲酶水解作用下产生氨使溶液pH升高，引起甲酚红溶液颜色变化，从而根据颜色深浅来判断尿素含量，当前研究一致认为该方法具有简单、快速、灵敏等优势，因而可以在样品快速测定中予以推广使用。

但是以上方法均存在一定的局限性，对二甲氨基苯甲醛(PDAB)比色法的灵敏度不高，且操作过程中要严格控制显色剂的加入量，不利于操作。酶偶联法所需试剂价格昂贵，且溶解后不稳定，需借助紫外分光光度计测试。甲酚红法在碱性环境下才能显色，而脲酶一般在偏酸性环境下活性最佳，在碱性条件下脲酶活性不高甚至失活，导致检测误差率高。

因此，以上这些方法有的需要借助实验室仪器、有的灵敏度不高、有的原料成本过高，并不适合现场进行大批量快速检测，更不适合用于普通的家庭自检使用，难以满足简单快速便携检测的要求。

发明内容

本公开是有鉴于上述现有技术的状况而提出的，其目的在于提供一种能够对待测样品进行快速便捷、灵敏度、准确度较高的半定量分析检测的尿素检测的试纸及该试纸的制备方法。