[发明专利]用于肌红蛋白检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法

说明书

本发明涉及电化学检测领域，特别涉及用于肌红蛋白(Myoglobin)检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法。本发明采用方法为电化学发光法，采用吡啶钌作为化学发光标记物具有明显优势，主要表现在：灵敏度更好，稳定性更好，钌是金属离子，分子量小，不影响抗体的空间位阻。生产过程短，重复性好，检测范围宽。电化学发光反应可控，降低信号采集难度。

技术领域

本发明涉及电化学检测领域，特别涉及用于肌红蛋白(Myoglobin)检测的组合物，该组合物的应用，包含该组合物的磁微球电化学发光免疫检测试剂盒，以及基于该组合物或试剂盒的磁微球电化学发光免疫检测方法。

背景技术

肌红蛋白是在心肌和骨骼肌内发现的细胞内结合氧血红素蛋白。在组织受到损伤后，肌红蛋白快速释放到循环系统内。在肌肉损伤情况下(如急性和慢性骨骼肌疾病、肾衰竭、心肌炎、心内直视手术和剧烈运动后)，可发现肌红蛋白水平上升。

肌红蛋白早在细胞损伤后2-4小时就释放到循环系统内，在9到12小时之间达到高峰浓度，在24到36小时内恢复到正常水平。在没有骨骼肌损伤情况下，肌红蛋白用作心肌梗塞病症的早期标志，用来排除非心肌梗塞病人。

肌红蛋白的阴性预测结果是99％，这样提高了急症部门的“排除”能力，有助于减少非急性心肌梗塞典型症状病人错误进入冠状动脉护理单元的数量。当结合其他心脏病标志(如CK-MB或心肌肌钙蛋白I)一起应用时，肌红蛋白具有卓越的诊断价值，可用于及早评估潜在的急性心肌梗塞病人。

到目前为止，用于检测人血清中Myoglobin的方法主要有：酶联免疫法(ELISA)和酶促磁微粒化学发光。本发明采用方法为电化学发光法，采用吡啶钌作为化学发光标记物具有明显优势，主要表现在：灵敏度更好，稳定性更好，钌是金属离子，分子量小，不影响抗体的空间位阻。生产过程短，检测范围宽，重复性好。电化学发光反应可控，降低信号采集难度。

发明内容

本发明提供了一种用于肌红蛋白(Myoglobin)检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法，具有生产效率高、检测时间短、适用于全自动检测，具有更高的灵敏度、线性范围宽等优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了用于肌红蛋白(Myoglobin)检测的组合物，包括Myoglobin试剂Ra、Myoglobin试剂Rb、链霉亲和素超顺磁微球；

所述Myoglobin试剂Ra包括含生物素标记的抗Myoglobin单克隆抗体；

所述Myoglobin试剂Rb包括含三联吡啶钌标记的抗Myoglobin单克隆抗体；

所述链霉亲和素超顺磁微球包括表面包裹带有链霉亲和素的超顺磁微球。

在本发明的一些具体实施方案中，所述超顺磁微球的粒径在1.5～5.0μm。

在本发明的一些具体实施方案中，所述Myoglobin试剂Ra中，每个抗体分子表面的生物素分子标记量为2～5个；所述Myoglobin试剂Rb中，每个抗体分子表面的钌分子标记量为2～10个。

在本发明的一些具体实施方案中，所述Myoglobin试剂Ra的制备方法为：在缓冲液存在的条件下，取抗Myoglobin单克隆抗体与生物素混合，制得所述Myoglobin试剂Ra；所述缓冲液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸盐缓冲液或pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。