[发明专利]一种肾癌相关的类器官组合及其应用

权利要求书

1.一种肾癌相关的类器官组合在建立肾癌药物敏感性模型中的应用，其特征在于，类器官的组织或细胞来自肾癌患者肾组织，包括癌旁组织、肾癌组织和癌栓组织，各组织类器官平行培养，均采取以下步骤获得：

1)将经过穿刺或手术后的肾癌患者获得的组织或细胞进行洗涤，剔除坏死组织，而后通过消化与物理解离相结合进行组织解离，得到解离细胞；

2)细胞筛收集解离细胞，而后进行洗涤、离心、重悬，得到重悬细胞；

3)所得到重悬细胞分别移入条件性培养基培养，所述条件性培养基培养为DMEM/F12+1×Glutamax+10mM HEPES+抗生素+1mg/mL collagenase+100units/mL IL-2+1.5％B27+10％Rspo1-conditioned medium+50ng/mL EGF+100ng/mL FGF+1.25mM N-acetylcysteine+10μM Rho-kinase inhibitor Y-27632+5μM A83-01，并选自平铺或与基质胶混合，放入容器器皿，构成类器官的2D和3D结构，不同组织的2D或3D的类器官共同构成所述类器官组合。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述肾癌患者为肾癌伴下腔静脉癌栓的患者。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述肾癌为透明细胞癌。

4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述洗涤使用PBS洗涤，消化和物理解离的步骤为：在含有1mg/mL胶原酶和10μM Y-27632的ADDF+++裂解液溶液中使用无菌剪刀将组织切碎成小块，于37℃孵育0.5-2小时，每10-20分钟吸取一次裂解液以促进消化，所述ADDF+++裂解液溶液含有Advanced DMEM/F12+1×Glutamax+10mM HEPES+抗生素+1mg/mLcollagenase+10μM Y-27632。

5.根据权利要求1或4所述应用，其特征在于，所述抗生素为青霉素和链霉素的组合。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药敏终点检测方法可采用MTT法或CCK8检测细胞增殖的方法来确定药敏性。