[发明专利]一种慢病毒转染免疫细胞的方法有效
| 申请号： | 202110403031.1 | 申请日： | 2021-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN113122579B | 公开（公告）日： | 2022-03-29 |
| 发明（设计）人： | 李建强;牛星;邢思捷 | 申请（专利权）人： | 河北森朗生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 张羽 |
| 地址： | 050000 河北省石家庄市*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 转染 免疫 细胞 方法 | ||
1.一种在体外的慢病毒转染免疫细胞的方法，其特征在于：所述方法包括在含有前列腺素E2的转染体系中采用慢病毒转染免疫细胞，所述慢病毒包括嵌合抗原受体基因转录的RNA。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述免疫细胞为NK细胞或T淋巴细胞；所述T淋巴细胞为αβT细胞或γδT细胞。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述免疫细胞为NK细胞或γδT细胞，所述方法包括如下步骤：
（1）活化培养：采用活化培养基在培养板上培养所述免疫细胞，所述活化培养基包括KBM581、OK432、IFN-γ、IL-2、IL-15、IL-21和10%自体血浆，所述培养板包被活化抗体；
（2）转染：采用所述慢病毒转染所述活化培养后的免疫细胞；
（3）扩增培养：采用扩增培养基培养转染后的免疫细胞，所述扩增培养基包括KBM581、IL-2和5%自体血浆。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤（1）活化培养的时间为2-8天。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：所述前列腺素E2在所述转染体系中的浓度为0.5-2μM。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述慢病毒转染时用量为MOI=2-50。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述转染体系还包括无血清培养基，所述无血清培养基由KBM581和IL-2组成。
8.前列腺素E2在如下A1）或A2）中的应用，
A1）在提高在体外的慢病毒对免疫细胞的转染率中的应用；
A2）在制备提高慢病毒对免疫细胞的转染率的产品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述免疫细胞为NK细胞或T淋巴细胞；所述T淋巴细胞为αβT细胞或γδT细胞。
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