[发明专利]一种改进QuEChERS-高效液相色谱检测杂粮中三唑类杀菌剂的方法

说明书

一种改进QuEChERS‑高效液相色谱检测杂粮中三唑类杀菌剂的方法，属于食品安全检测领域，可解决QuEChERS方法中提取剂使用乙腈会对人体健康造成威胁的问题，本发明将QuEChERS方法把乙腈换为低共熔溶剂作为提取剂，既符合“绿色化学”的要求，又提高了提取效率。本发明包括三部分内容，一是低共熔溶剂的制备，二是改进QuEChERS方法进行样品的提取和净化，并进行了条件优化，得到提取的最佳条件，三是使用最佳条件提取，结合高效液相色谱仪进行检测，对5种杂粮进行实际样品的测定。该方法提取效率高、重现性好、耗时短、成本低、操作简单，且避免使用毒性试剂，对人体健康危害小，避免了有机试剂对环境的污染。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种改进QuEChERS-高效液相色谱检测杂粮中三唑类杀菌剂的方法。

背景技术

农药是防治植物病虫害鼠害、去除杂草、调节植物生长的化学药剂。在农业生产、农作物产业化机械化的生产过程中，使用农药，可以使得植物有效的免受虫害、鼠害、病菌害，可以有效预防并清除杂草，还可以调节植物生长水平，使得农作物产量提高，提升了农作物农产品的质量。然而，过量使用或不合理使用农药也会造成农药残留，通过食物链的传播最终威胁人类的身体健康和生命安全。

三唑类杀菌剂是全世界杀菌剂类别中销售量最高的一类杀菌剂。使用杀菌剂可以有效的杀灭病菌，使得农作物免受病菌的毒害，从而可以提高农作物产量。三唑类杀菌剂化学结构上共同特点是，其主链上含有羟基(酮基)、取代苯基和1，2，4-三唑基团化合物。从20世纪的70年代以来，三唑酮等三唑类杀菌剂进入我国的农药市场，获得了较好的反响，并应用于农业生产中。然而，由于三唑类杀菌剂化学稳定性、不易生物降解、易于在环境中运输，且具有高度的广普性，对多种农作物都适用，使得它不易分解或转化为其他物质，而在各种介质中存在时间较长，在食品中被检测出来，随着生物链的传递而威胁人类的生命健康。已经有研究表明，三唑类杀菌剂危及肝脏、肾脏、肠道等多种器官。杂粮作为特色农作物，近些年越来越被人们重视。由于其营养丰富、膳食纤维含量高而被消费者喜爱。因此，杂粮的食品安全不容忽视。

QuEChERS方法是近年来新发展起来的一种用于农产品检测的快速前处理技术。其原理和固相萃取的原理相似，都是利用固体吸附剂将样品中的杂质组分吸附，利用目标组分和杂质组分与吸附剂的作用力效果不同从而达到除去杂质、分离的效果。是一种“快速、简便、价廉、高效、稳定、安全”的前处理方法。然而，在该方法中提取剂通常使用乙腈，虽然乙腈不是高毒性试剂，但长期使用也会对人体健康造成一定的威胁。因而，寻找新型绿色环保提取剂很有必要。

发明内容

本发明针对QuEChERS方法中提取剂通常使用乙腈，长期使用也会对人体健康造成一定的威胁的问题，提供一种基于低共熔溶剂的改进QuEChERS方法结合高效液相色谱测定杂粮中三唑类杀菌剂残留的前处理方法。本方法具有高效、快速、绿色、环境友好的特点，可以应用于多种杂粮样品的检测。

本发明采用如下技术方案：

一种改进QuEChERS-高效液相色谱检测杂粮中三唑类杀菌剂的方法，包括如下步骤：

第一步，低共熔溶剂的制备：

将L-脯氨酸分别与乙二醇、乙醇酸和乙醇胺按比例混合，80℃水浴加热，边加热边搅拌，得到透明澄清液体，即低共熔溶剂，避光保存备用；

第二步，样品溶液的制备：

准确称取粉碎均质后杂粮样品，加入低共熔溶剂，加入氯化钠，涡旋辅助萃取，离心后取上清液备用；

第三步，净化和收集：

取上清液于另一个已经装有固体吸附剂的离心管中，涡旋后离心，取出上清液后用甲醇稀释，注入高效液相色谱仪进样检测；