[发明专利]一种高羊茅组培快繁方法有效
申请号: | 202110399455.5 | 申请日: | 2021-04-14 |
公开(公告)号: | CN112970584B | 公开(公告)日: | 2021-12-10 |
发明(设计)人: | 王茜;王志伟;王小利;陈莹;吴家海;柳嘉佳 | 申请(专利权)人: | 贵州省草业研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 张雪 |
地址: | 550006 贵州省贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高羊茅组培快繁 方法 | ||
1.一种高羊茅组培快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:以高羊茅的幼嫩叶片为外植体,依次用乙醇和升汞消毒处理;
步骤2:将步骤1消毒处理的外植体接种愈伤组织诱导培养基,诱导愈伤组织;培养条件为:室温、光强2000-2500lx、每天光培养时长6-8h,培养25-30天;所述愈伤组织诱导培养基以1/2MS培养基为基本培养基,并添加3-4mg/L2,4-D、0.5-1.5mg/L玉米素、0.1-0.2mg/LNAA、0.1-0.5mg/L蒜泥、20-25g/L蔗糖以及6-8g/L琼脂,pH6.0-6.5;
步骤3:步骤2培养所得愈伤组织转入分化培养基进行分化培养;培养条件为:室温、光强2500-3000lx、每天光培养时长8-10h,培养25-30天;所述分化培养基以1/2MS培养基为基本培养基,并添加0.5-1.5mg/L玉米素、1-1.5mg/L KT、0.1-0.5mg/L活性炭、0.5-1mg/L蒜泥、20-25g/L蔗糖以及6-8g/L琼脂,pH6.0-6.5;
步骤4:待步骤3培养的幼苗苗高达到3-5cm时,切下转移到生根培养基,生根培养;培养条件为:25℃、光强2500-3000lx、每天光培养时长为10-12h,培养25-30天;所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基,并添加1-2mg/L活性炭、0.5-1mg/L蒜泥、10-12mg/LKH2PO4、20-25g/L蔗糖以及6-8g/L琼脂,pH6.0-6.5;
步骤5:待根长出1-3条时,移除培养基,冲洗根部,移栽到含有珍珠岩的营养钵中,在室温环境中继续培养成苗;
步骤1中,将幼嫩叶片先用流水冲洗10-15min,再用75%乙醇消毒20-30s,无菌水冲洗3-5次,然后用0.1%升汞溶液消毒3-5min,无菌水冲洗3-5次,完成消毒处理;
步骤5中营养钵中还含有腐殖酸和草炭,所述珍珠岩:腐殖酸:草炭按质量比3:3:2混合。
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