[发明专利]一种β-烟酰胺单核苷酸的酶催化合成方法

权利要求书

1.一种β-烟酰胺单核苷酸的酶催化合成方法，其特征在于，以腺苷、烟酰胺、ATP或其盐、多聚磷酸激酶、Mg离子或锰离子、多聚磷酸盐以及磷酸盐为原料，在EC编号为EC2.4.2.1的嘌呤核苷磷酸化酶和EC编号为EC 2.7.1.22 烟酰胺核糖激酶的酶催化作用下合成β-烟酰胺单核苷酸，所述磷酸盐不包含多聚磷酸盐；所述嘌呤核苷磷酸化酶包含氨基酸序列如SEQ ID NOs.1-7所示中的一种或两种以上的嘌呤核苷磷酸化酶。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述烟酰胺核糖激酶来源于B. pseudomallei，Ashbya gossypii，Haemophilus influenzae，Saccharomyces cerevisiae，Schizosaccharomyces pombe，Salmonella typhimurium，Cupriavidus metallidurans，Xanthomonas campestris pv. Campestris，Agrobacterium vitis ， Pseudarthrobacter chlorophenolicus，Actinobacillus succinogenes ，Homo sapiens ， Ashbya gossypii中的一种或两种以上。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，各所述酶以表达各酶的宿主细胞、各酶的酶液或各酶的固定化酶形式参与酶催化反应。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述表达各酶的宿主细胞为含有表达各酶的载体或共表达两种酶的载体的大肠杆菌。

5.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述各酶的酶液为从表达各酶的宿主细胞中提取的酶液。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，反应过程维持反应液的pH在6.5-9.5之间。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，反应温度在25-50℃。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，还包括β-烟酰胺单核苷酸的纯化步骤：

经过滤、层析分析，浓缩结晶干燥后获得β-烟酰胺单核苷酸的纯品。