[发明专利]一种产志贺毒素大肠埃希氏菌的选择性分离培养方法在审

专利信息
申请号: 202110385203.7 申请日: 2021-04-09
公开(公告)号: CN112961809A 公开(公告)日: 2021-06-15
发明(设计)人: 李琼琼;杨美成;宋明辉;蒋波;范一灵;秦峰;刘浩 申请(专利权)人: 上海市食品药品检验研究院
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/02;C12R1/19
代理公司: 上海申新律师事务所 31272 代理人: 郎祺
地址: 200120 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 产志贺 毒素 大肠 埃希氏菌 选择性 分离 培养 方法
【权利要求书】:

1.一种产志贺毒素大肠埃希氏菌的选择性分离培养方法,其特征在于,步骤包括:

将食品样品加至酸处理培养基中,混匀并室温放置一定的时间后,加入中和/促生长培养基并培养一定的时间后,采用产志贺毒素大肠埃希氏菌显色培养基或麦康凯培养基进行划线分离。

2.根据权利要求1所述的选择性分离培养方法,其特征在于,步骤包括:

S1、以无菌操作称取一定量的食品样品,并加至盛有酸处理培养基的无菌均质杯或无菌均质袋进行均质处理,即得样品匀液;

S2、将所述样品匀液于室温环境下静置一段时间;

S3、以无菌操作加入中和/促生长培养基,混合均匀后进行增菌培养,即得增菌培养液;

S4、在无菌环境下,采用无菌接种环,将所述增菌培养液划线接种于产志贺毒素大肠埃希氏菌显色培养基或麦康凯培养基,进行选择性分离培养。

3.根据权利要求2所述的选择性分离培养方法,其特征在于,步骤还包括:

S5、在所述选择性分离培养结束后,挑取特征菌落,进行后续鉴定和确认。

4.根据权利要求2所述的选择性分离培养方法,其特征在于,所述酸处理培养基的配制方法包括:

以胰酪胨大豆肉汤培养基作为基础培养基,加入谷氨酸,并采用1mol/L HCl溶液调节pH至2.0,于121℃压力蒸汽灭菌15-20分钟后,即得所述酸处理培养基。

5.根据权利要求4所述的选择性分离培养方法,其特征在于,所述谷氨酸的终浓度为2mmol/L。

6.根据权利要求2所述的选择性分离培养方法,其特征在于,所述中和/促生长培养基的配制方法包括:

以胰酪胨大豆肉汤培养基作为基础培养基,加入Tris生物碱以及丙酮酸钠,于121℃压力蒸汽灭菌15-20分钟后,即得所述中和/促生长培养基。

7.根据权利要求6所述的选择性分离培养方法,其特征在于,所述Tris生物碱的终浓度为1.5%。

8.根据权利要求6所述的选择性分离培养方法,其特征在于,所述丙酮酸钠的终浓度为0.1%。

9.根据权利要求2所述的选择性分离培养方法,其特征在于,步骤S3中所述增菌培养为于36℃±1℃培养18-24小时。

10.根据权利要求2所述的选择性分离培养方法,其特征在于,步骤S4中所述选择性分离培养为于36℃±1℃培养18-24小时。

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