[发明专利]一种MALDI-TOF质谱平台检测麻醉药物和镇痛药物用药相关的基因位点的试剂盒

说明书

本发明公开了一种MALDI‑TOF质谱平台检测麻醉药物和镇痛药物用药相关的基因位点的试剂盒，其无需添加其它标记，仅需合成普通引物，检测成本低，适合大规模人群分子筛查和常规基因诊断；反应体系为非杂交依赖性，不存在潜在的杂交错配干扰，具有良好的准确性；检测通量大；只需最低2ng的DNA样本，就能进行分型，分析灵敏度高；具有极高的精确度和极快的速度，人力成本与检测成本低，适合大规模人群分子筛查和常规基因诊断。本发明实现了在同一试剂盒中检测麻醉药物及镇痛药物用药相关(恶性高热)的60基因位点，能有效解决因遗传多态性造成醉药物效果差异甚至致死等问题，可帮助医生调整麻醉方案，以取得高效、安全、经济的最佳治疗效果。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，具体地，涉及一种MALDI-TOF质谱平台检测麻醉药物和镇痛药物用药相关的基因位点的试剂盒。

背景技术

麻醉是指用药物或非药物方法使机体或机体一部分暂时失去感觉，以达到无痛的目的，多用于手术或某些疾病的治疗。麻醉用药一般分为麻醉药物和麻醉辅助药物两大类，其中麻醉药物被国家高度监管。麻醉药物通常兼具镇静、镇痛、肌松等多种功能，如七氟烷、丙泊酚等；麻醉辅助药物常常只具有某一方面功效，如镇静催眠、麻醉镇痛、肌松、拮抗、降压、止呕等。现代麻醉学开始于1846年，在麻醉药物的临床应用中，不同病人使用同一剂量的麻醉药物时，意识消失的时间、苏醒时间、麻醉深度、用药的发生率存在较大的个体差异。多年的研究发现，遗传因素是造成个体间药代动力学、药效学反应差异的重要原因。麻醉药物基因组学研究能够为麻醉药物的个体化用药和预防用药提供重要依据，准确预测病人对麻醉药物的反应，提高手术麻醉的安全性。基础研究提高了麻醉学专业性，实现临床和基础的相互转化，更好实现个体用药，实现麻醉药应用的安全和有效。

恶性高热(Malignant hyperthermia，简称MH)是一种严重的骨骼肌肉代谢亢进综合征，其为常染色体显性遗传性疾病。临床上挥发性吸入麻醉剂、去极化肌松药的使用及其他刺激(热、压力)均可能诱发恶性高热的发生。恶性高热易感者的骨骼肌细胞膜发育缺陷，在诱发药物作用下，使肌细胞浆内钙离子浓度迅速增高，使肌肉挛缩，产热急剧增加，体温迅速升高，同时产生大量乳酸和二氧化碳，出现酸中毒、低氧血症、高血钾、心律失常等一系列变化，严重者可致患者死亡。其发病过程凶险，在没有特效药物的情况下，病死率可高达70％以上，但是其特效药物丹曲林钠目前尚未在我国正式上市。恶性高热的诊断，对指导麻醉用药和早期确诊恶性高热具有重要的临床意义。

药物基因组学从基因水平阐述了基因多态性与药物效应的关系，进一步指导临床个体化给药。临床实践发现麻醉药物适用存在个体差异，随着人类基因组计划等基因研究深度的逐渐增加，一些基因位点的多态性已被发现与镇痛、镇静和肌松等麻醉效应相关，遗传多态性是造成个体对药物反应差异的重要因素之一。通过分析麻醉和镇痛药物相关的基因位点，能够帮助医生预测病人对麻醉及镇痛药物的反应，并根据病人的不同基因组学特性合理用药，达到提高药效，降低毒性，避免不良反应。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的上述不足，提供一组MALDI-TOF质谱平台检测麻醉药物和镇痛药物用药相关的基因位点的多重PCR扩增引物及单碱基延伸引物。本发明检测的对象包括了麻醉药物及镇痛药物(恶性高热)等方面相关的60个基因位点的基因型。其建立的检测试剂盒灵活性与可扩展性兼备，操作简单且高通量自动化，高通量且低成本，能有效解决因遗传多态性造成醉药物及镇痛药物效果差异甚至致死等问题，可帮助医生调整用药方案，以取得高效、安全、经济的最佳治疗效果。

本发明的第一个目的是提供一组MALDI-TOF质谱平台检测麻醉药物和/或镇痛药物用药相关的基因位点的多重PCR扩增引物。

本发明的第二个目的是提供一组MALDI-TOF质谱平台检测麻醉药物和/或镇痛药物用药相关的基因位点的单碱基延伸引物。

本发明的第三个目的是提供所述的多重PCR扩增引物中的一条或几条，和/或所述的单碱基延伸引物中的一条或几条在制备检测麻醉药物和/或镇痛药物用药相关的基因位点的基因型的试剂盒中的应用。