[发明专利]贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶在口腔科室卫生消毒中的应用

说明书

本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌YtnP‑同源内酯酶及其基因与应用。本发明首先公开了贝莱斯芽孢杆菌YtnP‑同源内酯酶，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明进一步公开了贝莱斯芽孢杆菌YtnP‑同源内酯酶在牙科椅式设备处理中的应用。本发明贝莱斯芽孢杆菌YtnP‑同源内酯酶能显著抑制铜绿假单胞菌的早期增殖、生物膜形成和毒力因子释放，是降低机会致病菌感染的有效途径，可作为一种新型的牙科卫生治疗消毒剂。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地说涉及贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶在口腔科室卫生消毒中的应用。

背景技术

现代牙科椅式设备(DCU)使用的水通过牙科单元水管(DUWL)的管道系统供应，可冷却集成的仪器并在牙科治疗过程中用于牙齿冲洗。研究表明DCU水样中的细菌(主要以铜绿假单胞菌为主)数量远远高于饮用水中允许的细菌数量，且细菌通过生物膜的形成适应DUWL的定殖和对消毒药剂的耐受力造成感染而损害健康。目前，标准的用水冲洗程序不能完全去除生物膜，使用抗生素又会引起病原菌耐药，使用戊二醛等化学试剂对病人和牙科人员也有危害。

群体感应(Quorum Sensing，以下简称QS)是一种通过感知自身诱导物浓度来调节种群行为的现象，包括孢子形成、生物膜和毒力表达。典型的QS细菌铜绿假单胞菌是引起口腔感染和继发性疾病的主要人类条件致病菌，和大多数革兰氏阴性病原菌的自动诱导剂被归类为N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl homoserine lactone,AHL)。它是一种等级QS系统，包括LasI-LasR系统感测自身诱导物高丝氨酸内酯，通过影响相关基因的转录和翻译来调节下游RhlI-RhlR和PqsABCDE-PqsR通路。因此，干扰AHLs水平会导致群体猝灭，并影响生物膜形成和毒力表达等基因表达，使细菌不易在DCU中定植污染。到目前为止，关于群体感应猝灭酶(以下简称QQ酶)的研究主要集中在降解AHL信号分子的酶上，包括AHL内酯酶、AHL酰基转移酶和AHL氧化还原酶三类。QQ酶来自于不同的细菌种类，大多来自芽孢杆菌。但由于QQ酶对温度和pH的敏感性在复杂的环境可能使酶失活，QQ酶的应用受到限制。

因此，提供一种能有效降解AHL，显著抑制铜绿假单胞菌的早期增殖、生物膜形成和毒力因子释放的酶类，并能应用在口腔科室卫生消毒中是本领域亟待解决的技术难题。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶。

本发明的第二目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶基因。

本发明的第三目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶基因的重组表达载体、细胞系、工程菌或宿主菌。

本发明的第四目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶基因的重组菌株。

本发明的第五目的是提供一种制备贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶的方法。

本发明的第六目的是提供上述贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶在口腔医疗卫生中的应用。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶，被命名为YtnP_DH82，来源于贝莱斯芽孢杆菌DH82菌株，所述贝莱斯芽孢杆菌YtnP-同源内酯酶是由序列表SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

SEQ ID NO.1：