[发明专利]一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法

说明书

本发明公开了一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，属于检测分析技术领域。其步骤：（1）取已知含量的甜菊糖苷，配制成不同糖苷含量的溶液，于紫外分光光度计210nm处测定吸光度，绘制标准曲线并得出糖苷含量和吸光度关系的计算公式；（2）取甜菊糖苷生产过程中的样品，经SPE小柱除杂后，于紫外分光光度计在210nm波长处检测吸光度，通过步骤（1）中的公式计算出糖苷的含量。本发明检测方法糖苷含量在0.01‑0.5mg/mL范围内线性范围良好，日间精密度＜10%，将检测时间由30min以上缩短至3min以内，实现了甜菊糖苷生产过程样品的即时检测。

技术领域

本发明属于检测分析技术领域，具体涉及一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法。

背景技术

甜叶菊（Stevia rebaudiana）属菊科多年生草本植物，原产于南美巴拉圭和巴西，是目前已知甜度较高的糖料植物之一，已成为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源。甜菊糖苷为甜叶菊中的主要有效成分，为贝壳杉烯二萜苷类物质，分子中含有多个糖基片段，易溶于水，是一种零热量的高倍甜味剂（其热量为蔗糖的300-500倍）。目前，中国是世界最大的甜叶菊种植国和甜菊糖苷生产供应国，2017年出口额达15亿人民币，国内甜菊总量占全球总量的80%以上。

目前，甜菊糖苷含量或方法的检测主要为HPLC法，如GB 8270-2014。文献研究也多集中于甜菊糖苷高精度检测方法的开发，如Caroline等研究的HILIC-MS/MS方法（J.Agric. Food Chem.2013614711312-11320）对主要甜菊糖苷进行定量分析2011年，ValerioPieri等采用¹H NMR对主要甜菊糖苷成分进行定量等。该类方法主要针对甜菊糖苷成品，检测方法精度高，可满足甜菊糖市场的交易公平性及科学研究数据的准确性。

甜菊糖生产过程很多环节甜菊糖苷需要即时检测，如甜菊糖提取后富集，行业内均采用吸附树脂完成。树脂吸附过程需尽量减少杂质在吸附树脂上的吸附，通常吸附树脂透甜，即甜菊糖苷泄漏临界点，切换吸附系统，启用下一套吸附树脂，进行单独或串联吸附。而树脂解析过程，则是使用尽量少的解析溶剂将糖苷解析完全，解析溶剂进液完成后，树脂柱孔穴中会残留一定体积的溶剂，需要使用水将该部分解析溶剂顶出，顶出液也称作解析尾液，解析尾液接收终点通常通过测量解析用溶剂的密度来判断，但溶剂中含有不同量的糖苷对溶剂密度影响较大。但目前，吸附过程中糖苷泄漏临界点和解析终点的判断多依靠工人口尝判断，一方面因味觉差异每个工人判断标准不统一，影响工艺稳定性，且该方法无法实现自动化控制，限制甜菊糖行业的发展。

现有甜菊糖苷检测方法主要为高效液相色谱法，通过不同物质极性不同，在液相分离柱上保留时间不同，将甜菊糖苷产品和其它杂质成分分离后，进行定量分析。该类方法虽检测精度高，但检测运行时间至少需要30min，无法满足生产即时检测的需求。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明提供一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，其技术方案是：

一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，包括以下步骤：

（1）取已知含量的甜菊糖苷，配制成不同糖苷含量的溶液，于紫外分光光度计210nm处测定吸光度，绘制标准曲线并得出糖苷含量和吸光度关系的计算公式；

（2）取甜菊糖苷生产过程中的样品，经SPE小柱除杂后，于紫外分光光度计在210nm波长处检测吸光度，通过步骤（1）中的公式计算出糖苷的含量。

所述甜菊糖苷生产过程中的样品为树脂处理过程中样品，包括吸附树脂下柱液和解析尾液。

所述甜菊糖苷生产过程中的样品糖苷含量为0.01～0.5mg/mL。

所述SPE小柱的填料为离子交换树脂，包括强碱交阴离子交换树脂、强碱交阴离子和阳离子交换树脂混床。

所述SPE小柱直径为1cm，装填高度为1～2cm。