[发明专利]一种尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查的方法

说明书

本发明公开了一种尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查的方法，属于医疗检测领域。尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂包括0.2～0.3体积份的尿素；4～8体积份的酚红；0.02～0.1体积份的proclin300；2～10体积份的pH缓冲液；5～15体积份的琼脂凝胶，其中尿素浓度≥7mg/ml，酚红浓度≥30×10^‑3mg/ml。该检测方法利用唾液中或活检标本中尿素酶与尿素的反应产物引发相应指标变化来测定尿素酶活性。检测步骤为：使用涂抹器装置采集适量样本，再使用涂抹器装置将整个样本从镊子中推到试剂盒中的凝胶表面下方，使尽可能多的样本暴露在凝胶中，静止2～3min，目视法观察凝胶颜色变化，若变红，则为尿素酶阳性，若不变色，则为尿素酶阴性。

技术领域

本发明属于医疗检测领域，具体涉及一种尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂、试剂盒及快速筛查的方法。

背景技术

罗宾医生沃伦和马歇尔在1982年首次从胃窦活检中培养出这种细菌，称之为弯曲杆菌样细菌。后来，这个属被命名为幽门螺杆菌，意思是螺旋状或螺旋状细菌。幽门螺旋杆菌已被证实可引起活动性慢性胃炎，是胃癌和粘膜相关淋巴型(MALT)淋巴瘤的危险因素。幽门螺旋杆菌寄生在人体消化道内，通常存在于胃黏膜上皮，亦可在口腔内繁殖。幽门螺旋杆菌所产生的尿素酶可迅速酶解尿素产生碱性的氨，所以幽门螺旋杆菌在胃内较不易受胃酸侵袭。

尿素酶是一种含镍的寡聚酶，可由口腔内可能含有的唾液链球菌、内氏放线菌、沃氏葡萄球菌、幽门螺旋杆菌等细菌产生。尿素酶能够引发多种人类疾病，与口腔相关的包括龋齿、牙周炎等。目前，尿素酶的检测方法主要有纳氏试剂比色法、拉曼光谱法、酚红指示剂法、胶体金免疫层析法、精密试纸法等。纳氏试剂含汞，拉曼光谱需使用硝酸银等有毒试剂且设备普及率较低，因此两种方法均未得到广泛应用。以胶体金免疫层析法为基础的唾液测试板、精密试纸法均可实现唾液中尿素酶的定性检测。尿素酶具高度同源性且能将尿素迅速水解为二氧化碳和氨，并引起溶液pH变化，基于此原理，酚红指示剂法可以快速定性胃粘膜等活体组织中的尿素酶。因此，发明一种以酚酞为指示剂快速筛查的凝胶试剂、尿素酶活性快速筛查的方法以及尿素酶活性检测显色时间快的检测盒具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种经改进后，检查性能提高尿素酶活性凝胶试剂，便捷、操作简单的尿素酶活性快速筛查的方法及试剂盒；该方法，只需要将采集样品擦拭于检测试剂的凝胶里，便可目视法直观且快速的实验检测；利用样品中的尿素酶与尿素的反应产物引发相应指标变化快速筛查幽门螺旋杆菌。

为了实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂，包括以下体积份的组分：

本发明中，所述凝胶试剂中尿素浓度≥7mg/ml，优选7～20mg/ml，进一步地优选7mg/ml；酚红浓度≥30×10^-3mg/ml，优选30×10^-3～50×10^-3mg/ml，进一步地优选30×10^-3mg/ml。

本发明中，pH缓冲液包括至少一酸和至少一碱混合而成，所述酸和碱均为可溶性的酸碱，且反应时不生成沉淀，也不与尿素发生化学反应。进一步地，优选pH缓冲液为2-(N-吗啉)乙磺酸一水物和氢氧化钠的混合物。

本发明中，pH缓冲液的pH调节至5～8，此条件下尿素酶的活性检测效果好。

一种尿素酶活性快速筛查的试剂盒，包括一塑料玻璃片，所述玻璃片的中心设有一个下凹的塑料玻璃试剂杯，所述试剂杯中装有所述尿素酶活性快速筛查的凝胶试剂，所述凝胶试剂是由尿素、pH指示剂酚红、抑菌剂proclin300、pH缓冲液倒入琼脂凝胶中均匀混合而成；塑料玻璃片上表面还贴有用于填写被检测者信息的标签，所述下凹的塑料玻璃试剂杯由标签密封遮盖。

本发明还包括一种尿素酶活性快速筛查的方法，具体步骤如下：