[发明专利]一种选择性降解肿瘤细胞膜上PD-L1蛋白的多肽与应用

说明书

本发明涉及医药及制药技术领域，尤其涉及一种选择性降解肿瘤细胞膜上PD‑L1蛋白的多肽与应用。本发明所述多肽可以通过肿瘤细胞外过表达的ALP作用下发生酶促原位自组装，且多肽分子中存在可特异性结合PD‑L1的^DPPA‑1序列，使得自组装后的多肽纳米纤维可以选择性地结合肿瘤细胞膜上PD‑L1来模拟其部分变性状态，将其一并内吞进细胞后通过蛋白酶体途径被降解，从而有效降解肿瘤细胞膜上PD‑L1蛋白，解除肿瘤细胞对免疫系统的控制，为肿瘤免疫治疗药物的制备提供新的思路。

技术领域

本发明涉及医药及制药技术领域，尤其涉及一种选择性降解肿瘤细胞膜上PD-L1蛋白的多肽与应用。

背景技术

免疫疗法已成为继手术、放疗和化疗之后的第四种肿瘤治疗手段，特别是针对免疫检查点分子的治疗在肿瘤的临床治疗上获得了非常积极的治疗效果。在众多免疫疗法的相关研究之中，以T细胞为基础的PD-1(细胞程序性死亡受体1)/PD-L1(细胞程序性死亡配体1)免疫检查点通路被认为是扩展免疫疗法的支柱，获得了极其广泛的关注。此前的研究表明，肿瘤细胞中PD-L1的过表达会增强肿瘤的生存能力和转移能力，从而导致肿瘤的免疫逃逸。肿瘤细胞会通过PD-1/PD-L1通路进行免疫抑制以实现局部生长，完成肿瘤的转移复发过程。因此，阻断PD-1/PD-L1免疫轴在阻止肿瘤免疫逃逸的过程中承担着重要角色，将其作为癌症治疗靶点具有坚实的理论基础。目前尚未见研究利用小分子来控制肿瘤细胞膜上PD-L1的表达水平，用于肿瘤的免疫药物的制备中。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种利用小分子控制肿瘤细胞膜蛋白的表达水平，从而应用于肿瘤免疫药物的制备中。具体的为一种选择性降解肿瘤细胞膜上PD-L1蛋白的多肽与应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种可选择性降解肿瘤细胞膜上PD-L1蛋白的多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。

作为优选，所述SEQ ID NO.1的氨基酸的结构式为：

作为优选，所述SEQ ID NO.2的氨基酸的结构式为：

作为优选，所述SEQ ID NO.3的氨基酸的结构式为：

作为优选，所述SEQ ID NO.4的氨基酸的结构式为：

本发明还提供了一种所述的多肽在制备肿瘤免疫药物中的应用。

本发明还提供了一种选择性降解肿瘤细胞膜上PD-L1蛋白的生物活性溶液，由所述的多肽制备而成。

本发明还提供了一种所述生物活性溶液的制备方法，包括如下步骤，将多肽、缓冲液和ALP混合后进行反应得到；

所述ALP的添加量为4～6U/mL。

作为优选，所述缓冲液为pH5.0～9.0的PBS；所述多肽与缓冲液的质量体积比为3mg：0.8～1.2mL。

本发明还提供了一种生物活性溶液在制备肿瘤免疫药物中的应用。

本发明提供的一种选择性降解肿瘤细胞膜上PD-L1蛋白的多肽与应用具有如下优点：

(1)本发明的多肽能够模拟PD-L1蛋白的部分变性状态，通过免疫印迹和免疫荧光实验，发现其可被细胞识别后内吞随后通过蛋白酶体途径被降解，有效地控制肿瘤细胞膜上PD-L1的表达水平，解除肿瘤细胞对免疫系统的控制，恢复机体对肿瘤的免疫杀伤，进而有效地抑制恶性肿瘤的生长速度。