[发明专利]一种水稻OsSagB基因及其在抗硝基化合物污染中的应用有效

专利信息
申请号: 202110376394.0 申请日: 2021-06-02
公开(公告)号: CN113174394B 公开(公告)日: 2022-11-11
发明(设计)人: 杨泽峰;陈茹佳;皇甫列翔;陈志阳;鲁月;徐辰武;徐扬;李鹏程 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N9/04;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 代理人: 徐素柏
地址: 225009 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 水稻 ossagb 基因 及其 硝基 化合物 污染 中的 应用
【权利要求书】:

1.一种水稻OsSagB基因的应用,所述水稻OsSagB的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其特征在于,通过OsSagB基因在水稻植株上的过表达,以提高水稻抗TNT硝基化合物的耐受性。

2.一种水稻OsSagB基因的应用,所述水稻OsSagB的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其特征在于,用于植物修复TNT硝基化合物污染。

3.一种提高水稻抗TNT硝基化合物污染的方法,首先将核苷酸序列如SEQ ID No.1所示水稻OsSagB基因连接至载体pCAMBIA1390上,构建重组载体pCAMBIA1390-OsSagB,其特征在于,再将所述pCAMBIA1390-OsSagB重组载体转入根癌农杆菌,转至水稻植株中,得到阳性OsSagB基因过表达的水稻植株,所述水稻植株可提高水稻抗TNT硝基化合物的污染。

4.根据权利要求3所述的提高水稻抗TNT硝基化合物污染的方法,其特征在于,所述重组载体pCAMBIA1390-OsSagB的构建方法为:

1)提取水稻叶片总RNA,将总RNA反转录为cDNA,以所述cDNA第一链为模板用扩增引物对,采用高保真KOD FX酶进行PCR扩增,利用琼脂糖凝胶试剂盒进行回收,得到核苷酸序列如SEQ ID No.1所示水稻OsSagB基因序列的扩增产物;

所述扩增引物包括扩增上游引物和扩增下游引物,所述扩增上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示,扩增下游引物如SEQ ID No.8所示;

2)用限制性内切酶KpnI和SpeI酶切pCAMBIA1390载体,得到酶切载体;

3)将步骤1)获得的扩增产物的基因片段与步骤2)获得的酶切载体进行连接获得重组载体pCAMBIA1390-OsSagB。

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