[发明专利]显色培养基、制备方法及菌株检测方法

说明书

本发明涉及微生物技术领域，提出了一种显色培养基，包括以下组分：麦芽糖8～12份、酵母粉4～6份、胨6～14份、L‑半胱氨酸盐酸盐0.4～0.8份、乙酸钠4～6份、磷酸氢二钾2～4份、柠檬酸三铵2～4份、硫酸镁0.2～0.5份、硫酸锰0.02～0.06份、琼脂13～17份、吐温1～2份、蒸馏水900～1000份。通过上述技术方案，解决了现有技术中无法对含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌组成的发酵剂中，混入其它少量未标识的菌株进行检测的问题。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体的，涉及显色培养基、制备方法及菌株检测方法。

背景技术

一般市场上的酸奶，是以新鲜的牛奶为原料，经过巴士杀菌后再向牛奶中添加(发酵剂)，经发酵后，再冷却灌装的一种牛奶制品。

其中菌种的选择对发酵剂的质量有重要作用，可根据生产发酵乳制品的品种，选择适当的菌种，并对菌株发酵的最适温度、产酸能力以及是否产生粘性物质等特性，进行综合性选择，还要考虑菌种间的共生性，使之在生产繁殖中相互益生。生产酸奶一般采用冻干菌种，主要为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合发酵剂，嗜热链球菌产酸，保加利亚乳杆菌产酸、产香。

严格控制发酵剂的质量，对发酵剂的微生物要求有：乳酸菌活菌数检测，遵循GB4789.35；霉菌和酵母检测，遵循GB 4789.15；肠杆菌科检测，遵循SN/T 0738；金黄色葡萄球菌检测，遵循GB 4789.10；单核细胞增生李斯特氏菌，遵循GB 4789.30；

防止仅含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌组成的发酵剂中，混入其它少量未标识的菌株，但是常规检测过程中，对产品进行非乳酸细菌、霉酵检测，缺少对污染其他非本类型的乳酸菌污染后的检测方法，目前没有标准的检测方法。比如仅含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌组成的发酵剂中，混入了不应该存在的植物乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的、嗜酸乳杆菌布氏乳杆菌等其中的一种或多种，就无法通过上述的检测方法，进行检测，这也是长期以来难以解决的技术难题。

用于乳酸菌培养的培养基很多，但对于保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌这两种菌，有时会遇到生长困难的问题，因此应选择合适的培养基。通常，乳酸菌能耐受低pH值，但对于其他不利条件非常敏感，例如，有些样品在接种前不能冷冻，选择合适的培养基也是难以解决的问题。

显色培养基是利用细菌具有的特异性，通过选择性培养的方法结合特异性酶底物，让目的细菌生长并呈现与其它生长出的细菌菌落明显不同的颜色或其他菌落特征，从而鉴别目的菌。显色培养最大的优点是直接使用标本，把细菌的分离培养与鉴别结合到一起，达到在分离的同时直接鉴别的效果。到目前为止，显色培养已经有多种，比如念珠菌显色培养基、B群链球菌显色培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基等等，但尚未发现有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌显色培养基问世。

发明内容

本发明提出显色培养基、制备方法及菌株检测方法，解决了现有技术中无法对含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌组成的发酵剂中，混入其它少量未标识的菌株进行检测的问题。

本发明的技术方案如下：

一种显色培养基，按照重量份包括以下组分：麦芽糖8～12份、酵母粉4～6份、胨6～14份、L-半胱氨酸盐酸盐0.4～0.8份、乙酸钠4～6份、磷酸氢二钾2～4份、柠檬酸三铵2～4份、硫酸镁0.2～0.5份、硫酸锰0.02～0.06份、琼脂13～17份、吐温1～2份、蒸馏水900～1000份。

作为进一步的技术方案，所述的显色培养基还包括万古霉素0.01～0.015份。

作为进一步的技术方案，所述的显色培养基还包括溴甲酚紫乙醇溶液0.003～0.004份。

一种显色培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1、按照所述的配方称取原料备用；