[发明专利]金精三羧酸在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用

说明书

本发明公开了金精三羧酸或其药学上可接受的盐在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用。通过对HBV感染和转染的肝细胞实施ATA治疗，发现HBV DNA水平显著降低，而病毒蛋白或转录本没有改变。ATA治疗并没有进一步降低HBV RNase H失活突变体转染的肝细胞的HBV DNA、病毒蛋白和转录本的水平。此外，ATA对转染拉米夫定耐药HBV突变体的肝细胞中的HBV DNA合成具有抑制作用。ATA是一种通过破坏病毒聚合酶RNase H活性来抑制HBV复制的有效抑制剂。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及金精三羧酸在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用。

背景技术

乙型肝炎病毒(HBV)感染是影响数亿人的全球性公共卫生问题，是肝硬化和肝细胞癌的高危因素。HBV是一个直径约42nm的二十面体纳米颗粒，病毒粒子由包膜和核衣壳组成，包膜含HBsAg、糖蛋白和细胞脂肪，核心颗粒含e抗原(HbeAg)、核心抗原(HBcAg)、环状双股HBV-DNA和HBV-DNA多聚酶(Pol)，是病毒的完整形态，有感染性(图1A)。HBV基因组有一个3.2千碱基对的部分双链松弛环状DNA(rcDNA)，一条不完整的(+)链和另一条在5'-端与Pol形成共价键的完整的(-)链。

HBV感染时，其HBsAg pre-S1与肝细胞基底外侧膜上的Na+-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)特异性结合，促进受体介导的病毒进入宿主(图1C)。HBV侵入肝细胞后脱去包膜，然后将rcDNA运输到肝细胞核内并完全连接形成共价闭合环状DNA(cccDNA)。cccDNA被进一步转录和加工以产生前基因组(pg)RNA和前核病毒RNA，用于随后在细胞质中翻译各种病毒蛋白，包括HBsAg、Pol、x蛋白和HBcAg。同时，pgRNA和Pol被堆积到子代核衣壳中。HBV复制依赖于Pol的正常功能，Pol是一种多功能酶，由四个结构域组成:末端蛋白(TP)、间隔区、逆转录酶(RT)/DNA聚合酶(HP)和RNase H(图1B)。重要的是，HBV的复制受逆转录酶控制，利用病毒pgRNA模板合成(-)链DNA，然后RNase H切割RNA/DNA的异双链，HP将(-)链DNA合成为(+)链DNA，进一步形成rcDNA，这些rcRNA被重新发送到细胞核进行cccDNA扩增，或者被重新组装成出芽病毒体。

长期以来，HBsAg疫苗已被证明在保护接种者免受HBV感染方面是有效的；然而，一旦感染，cccDNA可以在静止肝细胞的整个生命周期持续存在，而且不影响其活力；因此，当前病毒清除的效率不高。目前已有各种针对新靶点的抗HBV药物正在研发中，包括治疗性疫苗、干扰RNA、Toll样受体7激动剂、cccDNA合成抑制剂等，但大多并不能有效或彻底清除cccDNA，一旦停药，相当多患者会出现反弹，病情可能发生反复。此外，长期用药还可能导致耐药变异的发生。例如，拉米夫定(也称为3TC)是胞苷二脱氧核苷衍生物，是HBV复制过程中有效的逆转录酶抑制剂。但拉米夫定治疗需要长期口服，否则会复发，导致基因型突变和丧失敏感性。乙型肝炎基因治疗策略也有很多种。反义核酸在治疗乙型肝炎感染有一定的优势，但是，它们缺乏稳定性，作用不精确，限制了它们的应用前景。RNAi作为一种高效的序列特异性基因剔除技术在传染性疾病和恶性肿瘤基因治疗领域发展极为迅速，然而以RNAi为基础的治疗并不能完全消除cccDNA池。总之，多种治疗手段在抗HBV方面各有千秋，但均面临HBeAg血清学转换率低、HBsAg清除率低、停药后极易复发等问题。因此，研发抗HBV新药迫在眉睫。

综合分析以上抗病毒药物中存在的种种不足，可以认为尽管抗HBV药物可以有效抑制HBV的复制，提高患者的生活质量，但存在的无应答和耐药突变等问题，会加大后续治疗的难度，增加长期治疗的医疗成本。因此必须进行临床药物的不断创新和转变治疗理念，亟需对乙肝免疫机制进行深入研究，从现有的药物中筛选出疗效好、安全、可增强现有抗HBV药物疗效的药物，从而产生较好的社会效益及降低医疗费用的经济效益，最终将乙肝转变为能够治愈的疾病。