[发明专利]唾液酸化糖链的血清鉴定试剂在制备用于诊断肝脏疾病的试剂中的用途

说明书

本发明公开了唾液酸化糖链的血清鉴定试剂在制备用于诊断肝脏疾病的试剂中的用途，具体为一组可以诊断乙肝相关肝癌、非乙肝相关肝癌和肝硬化的分子标志物及检测方法，涉及分子诊断领域。在对血清N‑糖末端进行唾液酸特异性衍生化处理，并通过MALDI‑TOF质谱分析血清N‑糖组成成分后，发现存在一些糖链或糖链组合，其在血清中的相对强度，在乙肝相关肝癌、非乙肝相关肝癌、肝硬化患者和健康人中，分别存在显著性差异，因此该种组合方式可作为诊断乙肝相关肝癌、非乙肝相关肝癌和肝硬化的潜在标志物。

技术领域

本发明涉及肿瘤分子诊断技术领域，涉及唾液酸化糖链的血清鉴定试剂在制备用于诊断肝脏疾病的试剂中的用途，尤其涉及一组与血清N糖末端唾液酸相关的糖链作为乙肝相关肝癌、非乙肝相关肝癌及肝硬化的潜在标志物及其检测方法。

背景技术

乙型肝炎病毒(HBV)是世界上最常见的慢性感染之一，估计有2.57亿慢性感染者，是世界范围内导致肝癌的主要原因。HBV感染可长期刺激肝脏细胞并形成慢性炎症，这种慢性炎症的状态可以潜移默化的促进肝脏纤维化，促进早期肝细胞癌的发生，进而推动肿瘤的发展、侵袭和转移。

在世界范围内，肝癌是导致男性癌症相关死亡的第二大原因，每年有74.5万人死亡，是第六大常见癌症，发病率不断上升(每年约有80万新病例)。根据肝癌发病的相关原因，可将肝癌分为乙肝相关肝癌和非乙肝相关肝癌，评判标准为肝癌患者体内是否存在有乙型肝炎病毒感染。肝癌在早期无特殊症状出现，因此极难被及时发现，通常患者出现肝癌相关症状在中晚期，而中晚期肿瘤具有很强的侵袭和迁移能力，不利于治疗。肝癌的预后和病情的分期关系密切，分期越早，患者的预后越好，生存期越长。对于早期的肝癌，给予根治性手术切除，患者的5年生存率可以达到50％～60％左右。对于中期不能手术切除的肝癌患者，可以选择介入、消融、放化疗以及靶向治疗，5年生存率仅有20％左右。如果肝癌发展到晚期，出现全身的扩散，生存期非常短，大约6个月。因此急需寻找新的肝癌肿瘤标志物用于早期诊断肝癌，提高肝癌患者的总体生存率。

蛋白质糖基化修饰是最重要的蛋白质翻译后修饰之一，蛋白质功能的实现多与糖基化修饰密切相关。糖基化对于蛋白质的折叠、运输、定位起着重要作用，并参与受体激活、信号转导等诸多重要的生物进程。研究表明，糖基化修饰改变是肿瘤发生发展的共同特征。特征寡糖结构与特征寡糖连接的糖蛋白和糖脂已经成为重要的肿瘤标志物。目前临床许多肿瘤血清诊断生物标志物如CA19-9(消化道肿瘤)、CA242、CA72-4和CEA(胃癌、结直肠癌)、AFP(肝癌)、CA15-3和CEA(乳腺癌)、CA12-5和CA72-4(卵巢癌)、SCC和CEA(宫颈癌)等均为肿瘤发生后机体分泌的糖链或糖蛋白产物。而且，越来越多的研究人员关注将多糖作为疾病标记物这一研究前沿，基于质谱的对人血清的多糖鉴定已经发现了多个有潜力的癌症生物标记物。唾液酸是N-糖基化修饰的重要组成部分，唾液酸作为复合糖的组成部分镶嵌于所有细胞表面以及大多数脊椎动物糖蛋白和糖脂分子的末端最外侧,通过α2,3-和α2,6-键作为封端残基。研究表明，特征连接唾液酸表达的显著上调或下调变化与恶性肿瘤的发生、发展、侵袭、转移和预后不良等相关，有的作为肿瘤标志物或预后标志物，也可能成为肿瘤免疫治疗的靶点。

因此，寻找唾液酸相关的肝癌肿瘤标志物，使其能将乙肝相关肝癌、非乙肝相关肝癌、肝硬化和健康人区分便尤为重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足和缺陷，提供唾液酸化糖链的血清鉴定试剂在制备用于诊断肝脏疾病的试剂中的用途，具体为一组肝癌肿瘤相关的肿瘤标志物，为肝癌肿瘤的早期诊断提供新的方法。

为了解决上述问题，本发明提出以下技术方案：

唾液酸化糖链的血清鉴定试剂在制备用于诊断肝脏疾病的试剂中的用途，其中，所述的唾液酸化糖链选自：

α2,6唾液酸化糖链Hex5HexNAc3NeuAc1；