[发明专利]唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-15蛋白的核酸适配体及其应用

说明书

本发明公开了一种唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素‑15(Sialic acid‑bindingimmunoglobulin‑like lectin‑15，Siglec‑15)蛋白的核酸适配体，所述的核酸适配体包括如SEQ IDNO：1至SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列。本发明的核酸适配体能够提供Siglec‑15蛋白的快速、精准检测，同时适配体能够阻断其与T细胞表面受体相互作用，一定程度上恢复T细胞增殖活性，从而使得肿瘤微环境的免疫正常化，且不会引起严重的自身免疫反应。Siglec‑15核酸适配体可作为药物用于肿瘤微环境高表达Siglec‑15的癌症，成为肿瘤免疫治疗的潜在核酸药物，可能对抗PD‑L1治疗无效的患者有效，进而补充现有肿瘤诊断和免疫治疗体系。

技术领域

本发明涉及唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-15(Sialic acid-bindingimmunoglobulin-like lectin-15，Siglec-15)蛋白的核酸适配体及其应用。

背景技术

癌症是是全球性的公共健康问题，是全人类健康的重大威胁。随着科学的进步及癌症相关学科的发展，肿瘤免疫研究和免疫治疗得到高速发展。其中以PD-1/L1为代表的免疫抑制剂，在肿瘤免疫治疗中最引人瞩目，为广大肿瘤患者带来了新的希望，但这种免疫疗法并不是对所有肿瘤病人都有效，单用情况下PD-1/L1抗体对实体瘤的总体有效率仍在只有20％左右。

唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-15(Sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin-15，Siglec-15)可通过识别含有唾液酸的糖链结构，介导细胞与细胞或病原体间的相互作用，在固有免疫和适应性免疫中发挥重要的调控作用。研究表明Siglecl-15mRNA在众多癌症中表达上调，包括肺癌、肾癌、肝癌、结肠癌、膀胱癌、子宫内膜癌等，Siglecl-15在肿瘤细胞、与肿瘤相关的间质细胞、肿瘤浸润的巨噬细胞/骨髓细胞也均有检测到，其与T细胞表面受体相互作用会抑制T细胞增殖活性，最终导致肿瘤细胞发生“免疫逃逸”。同时Siglecl-15的表达与PD-L1相互排斥，提示这两种分子可能通过完全不同的机制介导免疫抑制。阻断Siglecl-15可以让肿瘤微环境的免疫正常化，不会引起严重的自身免疫反应，且可能对抗PD-L1治疗无效的患者有效。

目前，包括Siglec-15在内的诸多免疫检查点抗体仍未上市，因为抗体的生产周期慢长，加上抗体存在不稳定、易失活以及成本高的缺点，因此亟需发展其他更稳定，更有效和更低成本免疫治疗药物。核酸适体，是从人工合成的随机寡核苷酸文库中体外筛选得到的能够高亲和性和高特异性地与靶标分子结合的寡核苷酸，大多数的核酸适体都是通过指数富集配体进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment，SELEX)筛选获得。核酸适体作为一种特异的识别分子，由于其对靶标具有较高特异性和亲和力，与抗体相比合成简单、修饰方便、体积小、免疫原性低、价格低廉，引起了基础研究和应用研究的广泛关注，在生物传感器、成像探针、疾病早期检测、药物制剂等方面具有巨大的应用潜力。因此，开发Siglecl-15核酸适体用于肿瘤免疫治疗具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的主要目的，在于提供Siglec-15蛋白的核酸适配体，所述的核酸适配体包括如SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：7任一所示的核苷酸序列。

优选地，所述的核酸适配体为SEQ ID NO：3。

本发明的另一目的，在于提供所述的Siglec-15蛋白的核酸适配体，在Siglec-15蛋白识别中的应用。

本发明的另一目的，在于提供所述的Siglec-15蛋白的核酸适配体，在表达Siglec-15蛋白肿瘤细胞、与肿瘤相关的间质细胞、肿瘤浸润的巨噬细胞/骨髓细胞的检测方面的应用。