[发明专利]快速检测多酚的高效液相色谱-三重四级杆质谱联用方法

说明书

本发明公开了一种快速检测多酚的高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用方法，具有45种多酚的标准液，所述方法包括以下步骤：分别取10uL所述45种多酚的标准液后，混合成浓度为0.021mg/mL的混合标准溶液，再逐级稀释；将所述混合标准溶液稀释到1ppm，分别进行质谱参数的优化；用步骤S2优化得到的质谱参数，将稀释后的所述混合标准溶液进行高效液相色谱‑质谱分析，最终得到待测样品的质谱图。本发明的有益效果在于，具有测定范围广、灵敏度高、高效的特点，从而快速地对43种多酚进行定性和定量分析。

技术领域

本发明属于分析化学和生物化学技术领域，具体涉及一种快速检测多酚的高效液相色谱-三重四级杆质谱联用方法。

技术背景

多酚是植物体内重要的次生代谢产物，多酚化合物主要由酚酸、类黄酮和单宁三种成分组成，植物多酚不仅能协助植物防御病虫害的入侵，而且具有较强的抗氧化活性，能够有效降低因氧化应激产生的自由基，减少由氧自由基引发的各种慢性疾病，如心脑血管疾病、癌症、肥胖症、阿兹海默茨病、白内障和退行性功能病等。

目前，多酚的分析检测方法有电化学法、分光光度计法、薄层色谱法、高效液相色谱(HPLC)法等。分光光度计法多用于测定总酚含量，现今用于多酚组分定量的方法多为高效液相色谱法，但是高效液相色谱法灵敏度低，要求所有组分达到分离度才能进行定量。

发明内容

鉴于现有技术的缺陷，本发明旨在于提供一种快速检测多酚的高效液相色谱-三重四级杆质谱联用方法，本发明采用液质联用技术将高效液相色谱优秀的分离能力与质谱高灵敏度和高专属性的检测有机地结合在一起，灵敏度高、重现性好、检测物质范围广，检测物质不用达到完全分离即可进行定量。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

快速检测多酚的高效液相色谱-三重四级杆质谱联用方法，具有43种多酚的标准液，所述方法包括以下步骤：

S1分别取10uL所述45种多酚的标准液后，混合成浓度为0.021mg/mL的混合标准溶液，再逐级稀释；

S2将所述混合标准溶液稀释到1ppm，分别进行质谱参数的优化；

S3用步骤S2优化得到的质谱参数，将稀释后的所述混合标准溶液进行高效液相色谱-质谱分析，最终得到待测样品的质谱图。

需要说明的是，优化后所述质谱参数为CAD:4、CUR:30、GS1:55、GS2:55、IS:5500、TEM:-450、EP-10、CXP-12。

需要说明的是，所述高效液相色谱仪的色谱条件设定如下：

分析柱：F5，2.1×100,2.6μm；

流动相：超纯水(A)、乙腈(B)、梯度洗脱；

流速：0.1mL/min；

检测温度：40℃；

进样体积：5μL；

洗脱方式(负离子模式)：梯度洗脱，0min，A:B＝90:10；15min，A:B＝75:25；20min，A:B＝70:30；32min，A:B＝40:60；35min，A:B＝95:5；38min，A:B＝90:10；

检测时间：38min；

洗脱方式(正离子模式)：梯度洗脱，0min，A:B＝90:10；20min，A:B＝40:60；25min，A:B＝10:90；28min，A:B＝5:95；29min，A:B＝90:10；

检测时间：29min。