[发明专利]用于红薯粉条中木薯特异基因检测的LMCP引物组

说明书

本发明公开了用于红薯粉条中木薯特异基因检测的LMCP引物组，包括以下两条引物：P：5`‑TGTCCGAGGGTCTTTTTTCACGGCTATCGGTGGTTGG‑3`；如SEQ ID NO.1所示；D：5`‑GCCGTGGGCGAACTTTTGGTCCCGTTCGGCAGAC‑3`；如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种检测红薯粉条中木薯特异基因的方法：取待测样品，抽提样品DNA，用上述引物组进行恒温扩增；若扩增结果图中出现指数曲线，则该样品含有木薯rRNA特异基因片段；若扩增结果中没有出现特异梯状谱带，则样品中不含有木薯rRNA特异基因片段。本发明的方法检测速度快，可为纠正粉条市场乱象提供技术手段。

技术领域

本发明涉及用于红薯粉条中木薯特异基因检测的LMCP引物组，属于生物分子检测技术领 域。

背景技术

红薯(又名红苕、甘薯、地瓜、山芋等)是一种古老的薯类作物，种植过程中无农药污 染，低化肥使用，是消费者最放心的绿色食品原料之一。红薯富含蛋白质、淀粉、维生素及 多种矿物质，并有防癌、通便、养颜、益寿等功效，被誉为“天然绿色食品”和“长寿食品”，居绿色蔬菜之首。近些年来，红薯越来越多地被认作为保健食品，市场消费需求不断增加。随着人民生活水平的不断提高和饮食休闲文化欣然兴起，红薯已经上升为食品工业的主要优 质原料，在国际上享有盛誉，这也给中国的红薯粉条产业带来了巨大的市场契机。

粉条是我国人民喜食的传统食品之一，具有食用方便、快捷、营养合理和口味丰富等特 点，受广大消费者的喜爱和欢迎。其中红薯粉条始终伴随人们的日常饮食，其营养价值和适 宜口感深受喜爱。但是现在的粉条市场存在很多问题，由于玉米淀粉、木薯淀粉的价格比红 薯淀粉低很多，所以有很多不法商人为获取假货带来的暴利而向粉条中添加玉米淀粉、木薯 淀粉，用玉米淀粉制作所谓的“纯红薯粉条”，为让色泽形似、口感筋道，甚至添加墨汁和 工业用料石蜡等违规添加剂。因此鉴别“红薯粉条”的真假具有极其重要的意义。

目前为检测红薯粉条中含有的有害物质以及判断其真假，已经有很多种方法被建立，但 尚未建立从基因的角度检测红薯粉条中是否存在木薯特异基因的方法，对于鉴别是否用其他 淀粉制假红薯粉条而言，基因检测方法具有时间短，特异性强，灵敏度高等特点，极具研究 价值和意义。

发明内容

针对上述现有技术，本发明拟采用最新的核酸等温扩增方法(梯度熔解曲线核酸等温扩 增，Isothermal Amplification of Nucleic Acids with Ladder-shape MeltingCurve，缩 写为LMCP，中国发明专利申请号：202011105405.3；PCT申请号：PCT/CN2020/133584；该 专利申请目前尚未公开)，设计LMCP引物，建立木薯源成分的快速检测方法，为食品安全监 管提供技术支撑。本发明提供了一套利用等温扩增技术对木薯rRNA特异基因片段检测的引物 组，用于检测所抽提的粉条以及淀粉的DNA，对市场上红薯粉条的真实性起辅助识别作用。

本发明是通过以下技术方案实现的：

用于红薯粉条中木薯特异基因检测的LMCP引物组，包括以下两条引物：

P：5`-TGTCCGAGGGTCTTTTTTCACGGCTATCGGTGGTTGG-3`；如SEQ ID NO.1所示；

D：5`-GCCGTGGGCGAACTTTTGGTCCCGTTCGGCAGAC-3`；如SEQ ID NO.2所示。

用于红薯粉条中木薯特异基因检测的试剂盒，包括上述LMCP引物组。

上述LMCP引物组、试剂盒在检测红薯粉条中木薯特异基因中的应用。