[发明专利]一种用于大口黑鲈幼苗养殖调水微生态制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种制剂在用于大口黑鲈幼苗养殖的调水微生态剂中的应用，其特征在于，所述制剂由以下重量份的原料制成：枯草芽孢杆菌粉48份、光合细菌40份、乳酸杆菌5份、赤红球菌4份、酵母菌3份；

所述制剂中的芽孢杆菌，按重量计由枯草芽孢杆菌50％、地衣芽孢杆菌20%、蜡状芽孢杆菌20%、解淀粉芽胞杆菌10%组成；

所述制剂中的光合细菌，按重量计由蓝细菌35％、球形红假单胞菌23%、荚膜红假单胞菌20%、胶质红假单胞菌12%、沼泽红假单胞菌10%组成；

所述酵母菌为解脂耶氏酵母，选自CCTCC保藏号为M2013606的菌株；

所述赤红球菌选自CGMCC保藏号为17525的菌株；

上述制剂的制备方法，包括以下步骤：

S1：菌体的制备；

I：将所述比重的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌，置于发酵罐中，初始培养基为大豆粉40 g/L、玉米浆25 g/L、葡萄糖15 g/L、磷酸氢二钾3 g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸铵0.35g/L、酵母浸粉0.2g/L、硫酸锰0.2g/L、硫酸亚铁0.1g/L、碳酸钙0.1g/L；接种量2%，发酵温度37℃，搅拌速度为150-200rpm，培养16-24小时，控制发酵罐中的PH为6.5-7.0；

Ⅱ:将所述比重的蓝细菌、球形红假单胞菌、荚膜红假单胞菌、胶质红假单胞菌、沼泽红假单胞菌置于发酵盆中，初始培养基为醋酸钠1.145g／L、蛋白胨0.055g／L、碳酸氢钠0.6g／L、硫代硫酸钠0.4g／L、氯化钠0．3g／L、硫酸镁0.1g／L、磷酸二氢钾0.05g／L；接种量为10%，用60W白炽灯泡光照培养，温度在30-37℃，发酵时间为4-5天，控制PH为6.5-7.5；

Ⅲ：将所述的解脂耶氏酵母置于发酵罐中，初始培养基为甘油40 g/L、磷酸二氢钾42.9g/L、硫酸铵5g/L、硫酸钙1 g/L、硫酸钾14.3 g/L、硫酸镁11.7 g/L、PTM4储液2.5ml/L和维生素储液1.0 ml/L；接种量5%，发酵温度28℃，搅拌速度为300rpm，培养12-18小时，发酵过程中用50%的氨水控制发酵罐中的PH为5.5；

Ⅳ：所述的赤红球菌置于发酵罐中，初始培养基为糊精10g/L、葡萄糖15g/L、酵母提取物15g/L、玉米浆粉3g/L、改性聚硅氧烷消泡剂0.2g/L；在发酵过程中，搅拌速度控制在80～200r/min，移种后发酵初期温度28℃，24h后发酵温度32℃，发酵时间为24-36小时；

Ⅴ：所述的乳酸杆菌置于发酵罐中，初始培养基为糖蜜40g/L，玉米浆10g/L，磷酸氢二钾0.8g/L，转速130-160r/min，接种量2.0%，发酵温度32℃，发酵时间为12-18小时；

S2：将S1(I-Ⅴ)中得到的发酵液分别经10000r/min的转速高速离心20分钟，去除上清液，得到菌体；

S3：将S2中得到的菌体分别在-80℃低温下干燥12个小时，直至干燥块状；

S4：将S3中冻干得到的菌块研磨成粉，按上述比重充分混合，并装入密封袋内低温保存。