[发明专利]曲洛司坦及其杂质的分离检测方法及应用

说明书

本发明提供了一种曲洛司坦及其杂质的分离检测方法及应用，涉及分析化学技术领域。检测方法采用高效液相色谱法，色谱条件包括：以十八烷基键合硅胶为填充剂；以pH＝2‑4的酸性水溶液‑乙腈为流动相；梯度洗脱。本发明提供的曲洛司坦及其杂质的分离检测方法，通过对流动相、色谱柱的优化设计，可准确、有效分离检测曲洛司坦中的有关物质，如杂质4α,5α‑环氧‑2‑氰基雄甾‑2‑烯‑3,17β‑二羟基‑17‑醋酸酯和4α,5α‑环氧‑2‑氰基雄甾‑2‑烯‑3‑羟基‑17‑酮等。本发明色谱柱易得，流动相体系相对简单，经过系统方法学验证，专属性强、灵敏度高，达到主峰及各杂质有效分离，可用于曲洛司坦原料药中两种杂质的分离检测，提高了曲洛司坦制剂的安全性和有效性。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，尤其是涉及一种曲洛司坦及其杂质的分离检测方法及应用。

背景技术

曲洛司坦即4α,5α-环氧-2-氰基-雄甾-2-烯-3,17β-二醇，其能可逆性地抑制肾上腺皮质中的3β-羟基甾体脱氢酶和△5,4-异构酶，由此阻滞盐皮质激素及糖皮质激素的生物合成，主要用于治疗库欣综合征(皮质醇增多症)和原发性醛固酮增多症。

曲洛司坦合成过程的工艺杂质4α,5α-环氧-2-氰基雄甾-2-烯-3,17β-二羟基-17-醋酸酯(曲洛司坦杂质3)，17β-羟基-4α,5α-环氧雄甾烷并[2,3-d]异噁唑-17-醋酸酯(曲洛司坦酯化物)，17β-羟基-4α,5α-环氧雄甾烷并[2,3-d]异噁唑(曲洛司坦环氧物)；曲洛司坦杂质3的降解杂质为4α,5α-环氧-2-氰基雄甾-2-烯-3-羟基-17-酮(曲洛司坦杂质5)。其中曲洛司坦杂质5与曲洛司坦极性相近，利用普通液相色谱洗脱体系进行检测，难以进行有效分离。鉴于其原料的质量控制直接影响到制剂终产品的质量。因此，为更好控制原料药及制剂的质量，对曲洛司坦的杂质研究尤为重要。目前曲洛司坦原料及以上两种杂质在国内外药典中均未收载，故本发明对曲洛司坦原料药及其制剂质量控制有着重要意义。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种曲洛司坦及其杂质的分离检测方法，以期至少部分地解决上述技术问题中的至少之一。

作为本发明的第一个方面，本发明提供了一种曲洛司坦及其杂质的分离检测方法，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：以十八烷基键合硅胶为填充剂，以pH＝2-4的酸性水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。

进一步的，以流动相体积为100％计，梯度设置如下：

进一步的，以流动相体积为100％计，梯度设置如下：

进一步的，所述流动相A为0.05-0.15％磷酸水溶液。

进一步的，所述流动相A为0.1％磷酸水溶液。

进一步的，所用检测器为紫外检测器，检测波长为240-250nm。

进一步的，所用检测器为紫外检测器，检测波长为246nm。

进一步的，所用流速为0.7-1.3mL/min。

进一步的，所用柱温为55-60℃。

进一步的，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：以0.1％磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；所用检测器为紫外检测器，检测波长为242-248nm；所用柱温为56-60℃；所用流速为0.8-1.2mL/min；梯度设置如下：

进一步的，采用高效液相色谱法，色谱条件包括：以0.1％磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；所用检测器为紫外检测器，检测波长为246nm；所用柱温为60℃；所用流速为1.0mL/min；梯度设置如下：