[发明专利]一种用于橡胶树的胚性愈伤组织诱导培养基、诱导橡胶树体细胞胚发生的方法和应用

权利要求书

1.一种用于橡胶树的胚性愈伤组织诱导培养基，其特征在于，所述胚性愈伤组织诱导培养基以MS培养基为基本培养基，调整硝酸铵的浓度为330～1800mg/L，五水硫酸铜浓度为0.1～0.3mg/L，烟酸浓度为2.5～7.5mg/L，VB1浓度为0.25～0.75mg/L，添加生物素0.01～0.1mg/L，叶酸0.1～1mg/L，天冬酰胺100～600mg/L，水解酪蛋白100～600mg/L，蔗糖50～90g/L，Phytagel 2～3g/L，椰子水40～90ml/L和激素组合物，以胚性愈伤组织诱导培养基的体积计，所述激素组合物由以下质量浓度的组分组成：2,4-D 0.5～1mg/L、Zeatin 0.5～1mg/L和Picloram 0.5～1mg/L；或者2,4-D 0.5～1mg/L、KT 0.5～1mg/L和Picloram 0.5～1mg/L。

2.一种基于权利要求1所述胚性愈伤组织诱导培养基的诱导橡胶树体细胞胚发生的方法，其特征在于，包括如下步骤：摘取绿色至黄色、完全未开放的雄花并消毒；从消毒后的雄花中将雄蕊剥出并接种到胚性愈伤组织诱导培养基进行诱导培养，得到胚性愈伤组织；将胚性愈伤组织转接到体细胞胚分化培养基，进行分化培养，得到体细胞胚；所述分化培养基以MS培养基为基本培养基，调整其大量元素至原来的4/5，添加蔗糖70g/L，Phytagel 2.2g/L，6-BA 0.5mg/L、KT 3mg/L、NAA 0.05mg/L、GA3 0.5mg/L和ABA 1mg/L。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述消毒的方法包括如下步骤：将所述雄花用体积百分含量为70％～75％酒精水溶液表面消毒30～60s；酒精水溶液表面消毒后，用质量百分含量为0.1％氯化汞水溶液消毒10～15min；氯化汞水溶液消毒后，用无菌水冲洗。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述诱导培养的条件为：温度26～28℃，相对湿度65％～75％，黑暗条件下培养40～60d。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述分化培养的条件为：温度24～26℃，相对湿度65％～75％，黑暗条件下培养40～60d。

6.权利要求1所述的用于橡胶树的胚性愈伤组织诱导培养基或权利要求2～5任一项所述的方法在橡胶树体胚苗培养中的应用。

7.权利要求1所述的用于橡胶树的胚性愈伤组织诱导培养基或权利要求2～5任一项所述的方法在提高橡胶树体细胞胚发生率中的应用。

8.权利要求1所述的用于橡胶树的胚性愈伤组织诱导培养基或权利要求2～5任一项所述的方法在提高橡胶树花药体细胞胚发生率中的应用。