[发明专利]靶向PD-1的单域抗体及其衍生物和用途

权利要求书

1.一种靶向PD-1的单域抗体，所述单域抗体包括SEQ ID NO: 2所示的CDR1、SEQ IDNO: 3所示的CDR2和SEQ ID NO: 4所示的CDR3。

2.一种人源化的靶向PD-1的单域抗体，其特征在于，以权利要求1所述的单域抗体为基础对框架区FR1、FR2、FR3和FR4进行人源化。

3.一种靶向PD-1的抗体，所述抗体包括一个或多个如权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体或如权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体。

4.一种双特异性抗体，所述双特异性抗体包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体包括权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、或权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、或权利要求3所述的靶向PD-1的抗体。

5.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、或权利要求3所述的靶向PD-1的抗体，任选的接头序列以及免疫球蛋白的Fc片段。

6.一种核酸分子，所述核酸分子编码权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、权利要求3所述的靶向PD-1的抗体、权利要求4所述的双特异性抗体或权利要求5所述的融合蛋白。

7.一种表达载体，所述表达载体包含权利要求6所述的核酸分子。

8.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含权利要求7所述的表达载体，或者其基因组上整合有权利要求6所述的核酸分子。

9. 一种制备权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、权利要求3所述的靶向PD-1的抗体、权利要求4所述的双特异性抗体、或权利要求5所述的融合蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

1) 在适合的条件下，培养如权利要求8所述的宿主细胞，从而获得含有所述的靶向PD-1的单域抗体的VHH链、靶向PD-1的抗体的重链可变区、靶向PD-1的单域抗体、人源化的靶向PD-1的单域抗体的VHH链、靶向PD-1的抗体、双特异性抗体或融合蛋白的培养物；以及

2) 任选地，从所述培养物中分离或回收所述的靶向PD-1的单域抗体、人源化的靶向PD-1的单域抗体、靶向PD-1的单域抗体、双特异性抗体或融合蛋白。

10. 一种免疫偶联物，所述免疫偶联物含有：

1) 如权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、权利要求3所述的靶向PD-1的抗体、权利要求4所述的双特异性抗体或权利要求5所述的融合蛋白；和

2) 选自以下的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、或酶。

11.一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗或诊断有效量的权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、权利要求3所述的靶向PD-1的抗体、权利要求4所述的双特异性抗体、权利要求5所述的融合蛋白或权利要求10所述的免疫偶联物，和任选的药学上可接受的赋形剂。

12.权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、权利要求3所述的靶向PD-1的抗体、权利要求4所述的双特异性抗体、权利要求5所述的融合蛋白或权利要求10所述的免疫偶联物的用途，用于制备以下试剂：

1) 检测PD-1的试剂；

2) 阻断PD-1与PD-L1结合的试剂；

3) 治疗肿瘤的药物。

13.一种试剂盒，所述试剂盒中包括：

1) 权利要求1所述的靶向PD-1的单域抗体、权利要求2所述的人源化的靶向PD-1的单域抗体、权利要求3所述的靶向PD-1的抗体、权利要求4所述的双特异性抗体、权利要求5所述的融合蛋白、权利要求10所述的免疫偶联物或权利要求11所述的药物组合物；

2) 容器；和

3) 任选的使用说明书。